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目的 HECTD3是一种最近研究发现的E3泛素连接酶,可使多种凋亡相关蛋白多聚泛素化(如Malt1和Caspase-8),进而通过调节凋亡信号促进癌细胞的存活。研究发现,与正常乳腺组织相比,HECTD3在乳腺癌组织中的表达显著上调。MicroRNA是一类非编码单链小分子RNA,大多数microRNA与靶基因mRNA的3’非编码区(3’untranslated region,3’UTR)结合,通过转录后抑制翻译来调控基因表达。本文旨在研究调控HECTD3的microRNA,并探讨其对HECTD3的具体作用机理,揭示HECTD3在乳腺癌等肿瘤中表达上调的机制。方法应用TargetScan等软件预测可能作用于HECTD3 mRNA 3’UTR的microRNA及其结合位点;根据预测结果 ,构建包含HECTD3 mRNA 3’UTR的荧光素酶报告载体,通过检测microRNA对荧光素酶活性的改变加以验证;在MDA-MB-23 1乳腺癌细胞系中过表达相关microRNA,通过Westem blot检测HECTD3蛋白的表达情况。结果 TargetScan等生物软件预测得到1 2种可能发生调控作用的microRNA;荧光素酶报告实验结果表明,过表达miR-153能显著降低荧光素酶活性,提示miR-153参与调控HECTD3;并且miR-153不能明显降低带有突变miR-153作用靶位点3’UTR的荧光素酶活性;Westem blot结果显示,过表达miR-153能显著下调HECTD3蛋白的表达水平,进一步验证了miR-153可以调控HECTD3的表达。结论 miR-153通过直接作用于HECTD3 mRNA的3’UTR抑制HECTD3蛋白的表达;TCGA数据库分析得出,miR-153-2高表达与乳腺癌5年生存期相关(HR=0.945,Pvalue=0.049),该结果为进一步研究HECTD3在乳腺癌等肿瘤中表达上调机制提供理论基础。