【摘 要】
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提取毒害艾美耳球虫配子体总RNA,RT-PCR扩增获得毒害艾美耳球虫Engam59基因,进行克隆测序和序列分析.Engam59基因全长为1473 bp,其中包含一个完整的开放阅读框,大小为147
【机 构】
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扬州大学,兽医学院,江苏,扬州 225009
【出 处】
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中国畜牧兽医学会兽医寄生虫学分会第十三次学术研讨会
论文部分内容阅读
提取毒害艾美耳球虫配子体总RNA,RT-PCR扩增获得毒害艾美耳球虫Engam59基因,进行克隆测序和序列分析.Engam59基因全长为1473 bp,其中包含一个完整的开放阅读框,大小为1473 bp,编码490个氨基酸,含有一个富含酪氨酸和丝氨酸和一个富含脯氨酸-甲硫氨酸的特征性结构域,与柔嫩艾美耳球虫Etgam5基因的同源性为93.4％,与巨型艾美耳球虫Emgam56基因的同源性为61.4％.选取Engam59基因中免疫原性较强的片段,设计特异性引物,扩增得到产物为687 bp,构建原核表达质粒pET28a(+)-Engam5,成功诱导表达,融合蛋白大小约28 kDa(rEnGAM59).重组蛋白均能识别抗6×HIS标签单抗,并能识别鼠抗rEnGAM59多抗.免疫组化分析结果显示,Engam59基因表达产物主要存在于配子体内的成壁体上,参与卵囊壁的形成.
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