【摘 要】
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目的 探讨沙眼衣原体pORF5蛋白对IL-1β和IL-18等促炎性细胞因子的诱生作用,并初步分析其分子机制.方法 采用分子生物学方法制备、纯化沙眼衣原体pORF5蛋白,用3～36μg/mL不同
【机 构】
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南华大学医学院病原生物学研究所421001
【出 处】
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中华医学会第十一次全国临床微生物学术年会、全球华人临床微生物与感染症学会学术论坛暨第四届国际临床微生物及抗微生物化疗学术
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目的 探讨沙眼衣原体pORF5蛋白对IL-1β和IL-18等促炎性细胞因子的诱生作用,并初步分析其分子机制.方法 采用分子生物学方法制备、纯化沙眼衣原体pORF5蛋白,用3～36μg/mL不同浓度刺激THP-1细胞,并于Oh、8h、16h、24h、36h收集上清及细胞,ELISA检测IL-1β和IL-18的含量;QRT-PCR检测NALP3炎性体和IL-1β和IL-18 mRNA表达水平;分别用NALP3 siRNA、ASC siRNA转染THP-1细胞24h或用Caspase-1抑制剂(Z-YVAD-FMK)和p38抑制剂(SB202190)预处理THP-1细胞30min后,再用24μg/mL的pORF5蛋白刺激THP-1细胞24h,ELISA检测IL-1β、IL-18和Caspase-1产生水平,QRT-PCR测定IL-1β、IL-18和NALP3炎性体mRNA的表达,Western blot测定Caspase-1的表达及p38磷酸化水平.
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