【摘 要】
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目的: 建立快速检测致病性猪链球菌种及1、2、7型的多重PCR方法，并进行初步的临床应用。方法:根据猪链球菌种特异的gdh基因序列及1(14)，2(1/2)、7型型特异的cps1I、cps2H、cps7H基因序列，分别设计了4对引物，预计扩增的目的基因片段分别为689bp、441bp、542bp和232bp。通过对单个基因PCR和多重PCR扩增条件.反应体系进行优化，建立了快速检测猪链球菌种及其1
【机 构】
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河南农业大学牧医工程学院 河南郑州 450002 郑州牧业高等专科学校 河南郑州 450002
【出 处】
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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第四次猪病学术研讨会
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目的: 建立快速检测致病性猪链球菌种及1、2、7型的多重PCR方法，并进行初步的临床应用。方法:根据猪链球菌种特异的gdh基因序列及1(14)，2(1/2)、7型型特异的cps1I、cps2H、cps7H基因序列，分别设计了4对引物，预计扩增的目的基因片段分别为689bp、441bp、542bp和232bp。通过对单个基因PCR和多重PCR扩增条件.反应体系进行优化，建立了快速检测猪链球菌种及其1(14)、2(1/2)、7型的四重PCR方法。利用保存的猪链球菌不同血清型菌株和其他相关标准菌株作为参考菌株进行特异性生和敏感性试验。并用所建立的四重PCR方法对河南省不同地市的39份猪扁桃体样品进行检测，并选取部分样品通过PCR产物序列测定进行了验证。结果: 所建立的四重PCR方法特异、敏感，对猪链球菌2型的最低检出水平为2.52CFU。临床检测及测序结果显示该多重PCR准3确性很好。结论: 建立的四重PCR方法可用于猪链球菌主要致病血清型的快速检测。
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