【摘 要】
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为了满足贝类派琴虫病的快速检测需要,本研究选择派琴虫保守的核糖体DNA ITS-2区域设计引物,通过对反应体系和反应条件的优化,首次建立了LUX荧光PCR检测派琴虫的方法。试验表明,所建立方法检测质粒模板DNA的动态范围为1.0×101~1.0×108,敏感性为10拷贝质粒DNA。采用模拟阳性样品试验,可检测到100拷贝质柱DNA.而且与贝类的包拉米原虫、隐孢子虫等其它寄生性原虫无交叉反应,也不受
【机 构】
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内蒙古农业大学 内蒙古呼和浩特010018 中国检验检疫科学研究院 北京 100029 中国检验检
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为了满足贝类派琴虫病的快速检测需要,本研究选择派琴虫保守的核糖体DNA ITS-2区域设计引物,通过对反应体系和反应条件的优化,首次建立了LUX荧光PCR检测派琴虫的方法。试验表明,所建立方法检测质粒模板DNA的动态范围为1.0×101~1.0×108,敏感性为10拷贝质粒DNA。采用模拟阳性样品试验,可检测到100拷贝质柱DNA.
而且与贝类的包拉米原虫、隐孢子虫等其它寄生性原虫无交叉反应,也不受组织DNA的干扰.50份采集样品的检测结果与RFTM培养方法一致。本研究所构建的派琴虫LUX荧光PCR检测方法具有快速、灵敏,特异等优点,可满足国内养殖场及进出口水生动物携带派琴虫的检测需要。
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