耳蜗前体细胞分化过程中miR-183家族的表达变化

来源 :第十四届全军耳鼻咽喉头颈外科学术大会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:dna0716
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
  目的:耳蜗前体细胞(CPCs)是一类存在于新生鼠类耳蜗内的前体细胞,可在体外增殖并分化出包括听觉毛细胞和支持细胞在内的所有耳蜗细胞类型。因此CPCs有希望应用于损伤后毛细胞的替代治疗。此外,CPCs在体外的分化过程可为我们提供研究耳蜗发育机制的体外模型,miRNA是一类高度保守的长度在22 nt左右的内源性非编码单链小RNA,具有调节细胞增殖、分化、凋亡和影响细胞命运的重要作用。我们拟用实时定量PCR技术观察miR-183家族在耳蜗前体细胞增殖和分化过程中的变化,并和神经干细胞(NSCs)的分化过程加以比较。
  方法:分别从新生大鼠仔鼠耳蜗和嗅球中分离和培养CPCs和NSCs,加入血清促使两种悬浮生长的细胞贴壁并分化。收集CPCs细胞球和CPCs来源的分化6天和14天的细胞,提取总RNA,用实时定量PCR技术检测miR-183家族三个成员miR-96/182/183在三个分化时间点的表达变化。收集NSCs细胞球和NSCs来源的分化6天和14天的细胞,分析每个miRNA在三个时间点的表达变化,并与其在CPCs分化过程的表达变化加以比较。
  结果:miR-183家族的三个成员在CPCs分化过程中表达模式不同。miR-96和miR-182的表达量均随着分化的进行急剧下降,miR-96在分化第14天时的表达量下降至未分化阶段的15%,miR-182下降至未分化阶段的4%。而miR-183先是随着分化表达量增高至未分化阶段的2.3倍达到高峰,然后在分化第14天的时候下降至未分化阶段的15%。miR-96和miR-183均无法在NSCs分化过程中检测到,miR-182仅能在未分化的NSCs中检测到,但表达量极低,仅为CPCs的5%。经统计学检测,以上变化均具有统计学意义。
其他文献
目的:  提高对蝶窦真菌感染性疾病的认识.  方法:  对35例真菌性蝶窦病变(术后病理图片证实为真菌感染)的患者一般情况、临床特征、影像学表现、治疗情况等进行分析,35例病人均在鼻窦内窥镜下行蝶窦开放、窦内病变清除手术,术中将上鼻甲或中鼻甲后端切除,暴露蝶筛隐窝,在距后鼻孔上缘之上1.5 cm左右、靠近鼻中隔附近找到蝶窦开口,打开蝶窦前壁,进入蝶窦,可见窦内果酱或油灰样黄色或黄褐色分泌物并有干酪
目的:  鼻内镜的应用在临床逐渐被开展起来,目前已成为鼻科常规检查器械,并被广泛应用于鼻腔、鼻窦疾病的检查及治疗中.但鼻内窥镜检查直到21世纪初期才逐渐在招飞体检中开展起来.现通过对2005年-2010年参加飞行学员体格检测的应届高中毕业生进行的鼻内窥镜检查,并根据检查结果,分析、探讨鼻内窥镜在招飞耳鼻喉科全面检测中的应用。  方法:  按招飞体检程序,对第一轮体检的学生行常规耳鼻喉科检查;对前、
目的:研究大鼠面神经核中降钙素基因相关肽(tyrosine hydroxylase,CGRP)、胆碱乙酰转移酶(choline acetyl transferase,ChAT)免疫反应阳性神经元胞体及神经纤维的分布特点并探讨其意义。  方法:对实验动物大鼠行灌注、取材后,对大鼠面神经核行冰冻切片,采用免疫组织化学及免疫荧光双标技术,分别设立CGRP、ChAT免疫组化染色组和CGRP、ChAT免疫荧
目的:研究GRP78/Bip在条件GJB2基因敲除小鼠耳蜗中的表达情况,探讨内质网应激(Endoplasmic Reticulum Stress,ERS)与非综合征性聋发生的相关性。  方法:敲基因动物Cx261oxp/loxp;Pax2 Cre/+ (cCx26)为实验组,野生型BALB/c小鼠作为正常对照,两组分别选取P8、P12和P21三个发育阶段小鼠,每个阶段2只进行实验。耳蜗冰冻切片,免
目的:探讨模拟失重对豚鼠听觉器官的功能及其超微结构的影响。  方法:选用健康、白色、红目豚鼠22只,耳镜检查耳鼓膜正常、耳廓反应灵敏。随机分为单纯失重组(实验组)16只和对照组6只。失重采用后肢悬吊法,身体纵轴与水平线呈-30°。实验前和实验5天后及脱离失重3天,分别测试听性脑干诱发电位(ABR),按照上述各时间点取耳蜗标本,经过相应处理后行扫描电镜和透射电镜观察。  结果:实验前豚鼠ABR阂值(
目的:利用ouabain的嗜神经毒性,探讨建立SD大鼠耳蜗螺旋神经元损伤动物模型的方法,为进一步研究耳蜗螺旋神经元损伤及其修复过程中分子改变及信号转导机制奠定基础。  方法:采用耳后进路,解剖显微镜下暴露听泡,电钻磨开听泡,暴露耳蜗,以耳蜗底转、镫骨动脉为解剖标志,显露圆窗龛入口,运用微量泵及微量注射器将10mM ouabain 10 μl注射到圆窗龛,注射速度设置为1μl/分钟,注射结束后缝合手
目的:研究内向整流型钾离子通道基因Kir4.1在Cx30基因敲除小鼠不同生长发育期内耳的表达变化,明确Cx30敲除对内耳Kir4.1基因表达的调节和影响,以探讨Cx30基因敲除致聋的病理机制。  方法:将实验动物(CBA/Caj小鼠)按基因型分为Cx30基因敲除组和野生型对照组,分离提取出生后不同发育时期的耳蜗组织标本,采用实时荧光定量PCR (realtime PCR)技术,从转录水平比较各时期
目的:microRNA let-7包括多个家族成员,其序列和功能在不同物种中高度保守。研究发现let-7可通过靶向作用细胞周期分子调控干细胞的增殖、分化。耳蜗前体细胞具有自我更新能力及多向分化潜能,可分化为毛细胞、支持细胞等多种细胞类型,为我们提供了研究毛细胞发育及促再生研究的体外模型。本研究通过观察let-7家族在耳蜗前体细胞增殖、分化中的表达变化,探讨利用let-7诱导耳蜗毛细胞再生的可能性。
目的:本组实验旨在探明在甲状腺癌、甲状腺瘤及正常甲状腺组织中SOCS-3的表达情况和其与相关临床病理参数之间的关系,以及探讨SOCS-3与JAK/STAT通路中的STAT3、P-STAT3、VEGF及Bcl-2蛋白因子表达的相关性,从而为甲状腺癌的发病机制研究奠定实验基础,提供理论依据,为甲状腺癌的临床预防及治疗提供新的思路。  方法:应用免疫组织化学SP法检测JAK/STAT通路中的SOCS-3
目的:Nob1基因是2005年克隆的一种锌带基因,其产物为转录相关锌带蛋白,具有类似转录因子的调节作用。我们前期实验制备了Nob1的单克隆抗体,并发现其在药物性耳聋豚鼠的螺旋神经节处呈强阳性表达。本实验通过研究噪声暴露前后大鼠耳蜗基因表达谱的变化,进一步明确该基因与耳聋的关系,为发现新的内耳调控基因,开发新的耳聋基因治疗方法奠定实验基础。  方法:将实验动物随机分为2组,每组20只,第一组为实验组