大蒜蒜氨酸指纹/特征图谱研究

来源 :第一届《药学学报》药学前沿论坛暨2015年中国药学会中药与天然药物专业委员会会议 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lixufengz
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  大蒜(Allium sativum L.)是葱属植物大蒜的鳞茎,为药食两用植物,大蒜及其制剂已被收入中国、美国、英国、欧盟和印度等多部药典,多以蒜氨酸或大蒜辣素为检测指标.蒜氨酸(Alliin)是大蒜中含量最高的含硫氨基酸.大蒜蒜氨酸是大蒜经提取、分离后的提取物,其中Alliin含量≥50%.Alliin等电点为4.86,在分离过程中,大蒜中与Alliin 等电点相近的氨基酸会与其一起被收集,成为大蒜蒜氨酸的相关物质.无损大蒜中没有大蒜辣素,破壁后存在于不同部位的Alliin与蒜酶相遇快速反应产生活性物质大蒜辣素.前期课题组已建立了大蒜及大蒜冻干粉HPLC 指纹图谱[1,2].本研究采用异硫氰酸苯酯柱前衍生高效液相色谱法,采用岛津VP-ODS C18(4.6 mm × 250 mm,5 μm)色谱柱,流动相A(pH值6.5醋酸醋酸钠溶液和乙腈)与流动相B [甲醇-乙腈-水(20:60:20)] 按梯度程序洗脱:0 → 5 → 6 → 14 → 18 → 32 → 34 → 38 → 42 → 45 →50 min,流动相A:100%→ 98%→ 95%→ 91%→ 79%→ 55%→ 45%→ 0%→ 0%→ 100%→ 100%; 检测波长254 nm,流速为1.0 mL·min-1,柱温35 ℃.方法精密度、稳定性及重复性实验均符合指纹图谱技术要求; 以蒜氨酸为参比峰,确定了9 个共有峰,并指认了其中6 个色谱峰,分别为丝氨酸、甘氨酸、精氨酸、丙氨酸、脯氨酸和蒜氨酸,10批大蒜蒜氨酸色谱图与典型指纹图谱相似度>0.97.建立的指纹/特征图谱可用于大蒜蒜氨酸的质量评价及质量控制.
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