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目的:研制病毒载体疫苗滴度测定用痘苗病毒滴度国家标准品。
方法:制备一份痘病毒母液, 加入保护剂,分装冻存,分发至我国4个不同实验室,按照统一的结晶紫染色蚀斑法实验方案进行协作标定,每次实验稀释2个稀释度,每个稀释度平行5孔,对标准品中痘病毒滴度进行赋值,对标准品进行分装重量精度、装量、外观、pH值、无菌试验等检测,并考核稳定性。
结果:利用 CEF细胞培养制备了一份大量的痘苗病毒标准品,分装重量精度为2.5%;装量检查合格:1ml/支; pH值为6.9;无菌试验合格;经过4个实验室的52次测定,病毒滴度的几何均数6.45,标准差为 0.27,总变异系数4.15%。95%的可信区间为:5.93-6.98。病毒滴度为2.82×106PFUml-1,95%可信区间为:8.51×105-9.55×106 PFUml-1。-20℃放置1年滴度无变化,2-8℃可稳定性放置10d, 37℃稳定性差,2d即开始滴度明显下降。
结论:该痘病毒标准品符合要求,可作为痘病毒载体疫苗滴度测定用标准品。
方法:制备一份痘病毒母液, 加入保护剂,分装冻存,分发至我国4个不同实验室,按照统一的结晶紫染色蚀斑法实验方案进行协作标定,每次实验稀释2个稀释度,每个稀释度平行5孔,对标准品中痘病毒滴度进行赋值,对标准品进行分装重量精度、装量、外观、pH值、无菌试验等检测,并考核稳定性。
结果:利用 CEF细胞培养制备了一份大量的痘苗病毒标准品,分装重量精度为2.5%;装量检查合格:1ml/支; pH值为6.9;无菌试验合格;经过4个实验室的52次测定,病毒滴度的几何均数6.45,标准差为 0.27,总变异系数4.15%。95%的可信区间为:5.93-6.98。病毒滴度为2.82×106PFUml-1,95%可信区间为:8.51×105-9.55×106 PFUml-1。-20℃放置1年滴度无变化,2-8℃可稳定性放置10d, 37℃稳定性差,2d即开始滴度明显下降。
结论:该痘病毒标准品符合要求,可作为痘病毒载体疫苗滴度测定用标准品。