家蚕杆状病毒bm64基因的功能研究

来源 :华东六省一市生物化学与分子生物学学会2014年学术交流大会暨浙江省第十一届学会会员代表大会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lcc54202346
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杆状病毒(Baculovirus)是一类专门寄生节肢动物的病原微生物,杆状病毒基因结构与功能的研究是杆状病毒分子生物学领域研究的热点之一.BmNPV bm64及其同源基因存在于所有鳞翅目杆状病毒和2/3的膜翅目杆状病毒基因组中,但其基因功能至今尚未阐明.生物信息学分析Bm64蛋白具有一个跨膜结构域。5RACE,3RACE实验确定bm64基因的转录起始位点约位于起始密码子上游140bp位置,转录终止位点位于终止密码子下游lObp位置。Real-time PCR检测表明bm64基因与晚期基因vp39转录时相相似,bm64基因属于晚期基因。Western blot检测病毒感染过程中Bm64蛋白表达时相,与bm64基因的转录时相结果相符,确定Bm64是病毒的晚期基因。利用Red重组系统和Bac-to-Bac系统成功构建bm64基因缺失的杆状病毒。bm64基因缺失的重组杆状病毒不能产生感染性病毒粒子,说明bm64基因是病毒复制的必需基因。本研究为杆状病毒的基因表达调控机制,杆状病毒的生物防治应用提供理论参考。
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