【摘 要】
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为了有效提高繁殖效率、利于良种保存和杂交配种,人工授精技术在养羊业中被广泛应用。然而精液采出后,不利于在体外长期存活,极大限制了优秀公畜精液的利用效率。所以,如何提高精液在体外的保存时间和质量成为提高人工授精效率的关键步骤。目前益母草碱已在心肌、成骨等细胞中被证实具有抗氧化作用。作为一种抗氧化剂,益母草碱在提升精液品质方面的研究鲜有报道。目的:本研究旨在通过检测精液品质、抗氧化能力、相关凋亡基因m
【基金项目】
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兵团重点领域科技攻关计划项目肉羊健康养殖模式关键技术集成创新与示范（项目编号:2021AB014）; 自治区多浪羊品种选育推广技术体系专项（项目编号:2021DLY-23）
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为了有效提高繁殖效率、利于良种保存和杂交配种,人工授精技术在养羊业中被广泛应用。然而精液采出后,不利于在体外长期存活,极大限制了优秀公畜精液的利用效率。所以,如何提高精液在体外的保存时间和质量成为提高人工授精效率的关键步骤。目前益母草碱已在心肌、成骨等细胞中被证实具有抗氧化作用。作为一种抗氧化剂,益母草碱在提升精液品质方面的研究鲜有报道。目的:本研究旨在通过检测精液品质、抗氧化能力、相关凋亡基因m RNA相对表达量、受胎率等指标综合评价益母草碱对绵羊精液保存效果的影响,为配制更适合绵羊精液保存的稀释液提供理论依据。方法:本研究在多浪羊精液常温、低温、冷冻保存稀释液中分别添加20、40、60、80、100μmol/m L浓度的益母草碱,在多浪羊精液常温、低温、冷冻保存过程中检测精子的活率、顶体完整率和质膜完整率等精液品质指标以及总抗氧化能力（T-AOC）水平、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）活性、超氧化物歧化酶（SOD）活性、过氧化氢酶（CAT）活性和丙二醛（MDA）含量等抗氧化指标,判断精液保存过程中益母草碱的最佳添加浓度;检测常温、低温、冷冻保存过程中与0μmol/m L组相比最佳添加浓度组的Fas、Caspase-3、Bax和BCL-2等相关凋亡基因m RNA相对表达量,探索益母草碱对绵羊精液保存过程中凋亡基因的影响;最后检测精液低温、冷冻保存后添加益母草碱最佳浓度精液的受胎率,判断添加益母草碱后对精液保存实际应用效果的影响。结果:研究结果表明,在保存稀释液中添加益母草碱后,与0μmol/m L组相比,能显著提高多浪羊常温、低温、冷冻保存精液的活率、顶体完整率和质膜完整率（P＜0.05）;并显著提升精液SOD、GSH-PX和CAT的活性,提高T-AOC水平并降低MDA的含量（P＜0.05）;其中在常温保存中,益母草碱在添加浓度为60μmol/m L时保存效果最佳（P＜0.05）,在低温保存中益母草碱在添加浓度为40μmol/m L时保存效果最佳（P＜0.05）,在冷冻保存中益母草碱在添加浓度为60μmol/m L时保存效果最佳（P＜0.05）;此外与0μmol/m L组相比,在常温、低温、冷冻保存过程中,添加最佳浓度益母草碱组的精子相关凋亡基因Fas、Caspase-3和Bax的m RNA相对表达量显著降低,抗凋亡基因Bcl-2相对表达量显著升高（P＜0.05）;同时在低温保存中添加浓度为40μmol/m L组精子的受胎率为75%,达到鲜精阴道输精的平均水平,冷冻保存中添加浓度为60μmol/m L组精子的受胎率为60%,达到鲜精阴道输精的最低水平。结论:综上所述,本研究证实在精液稀释液中添加益母草碱能有效提升常温、低温、冷冻保存的保存效果,其中在常温保存过程中添加浓度为60μmol/m L的益母草碱后可显著改善多浪羊常温保存精液品质,提升其抗氧化能力,同时起到抗凋亡作用;在低温保存过程中添加浓度为40μmol/m L的益母草碱后可显著改善多浪羊低温保存精液品质,提升其抗氧化能力,同时起到抗凋亡作用,使其受胎率达到鲜精阴道输精的平均水平;在冷冻保存过程中添加浓度为60μmol/m L的益母草碱后可显著提高多浪羊冷冻保存精液品质,提升其抗氧化能力,同时起到抗凋亡作用,使其受胎率达到鲜精阴道输精的平均水平。
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