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第一章补肾健脾、解毒利咽法对IgA分泌细胞分布及IgA表达的影响目的:在中医“喉肾相关”理论的指导下,以IgA分泌细胞为研究主线,探讨补肾健脾、解毒利咽法治疗IgA肾病的作用机制。方法:1.随机将SD雄性大鼠140只分为空白组（Control组）20只,造模组120只,黏膜免疫建模法制备IgA肾病动物模型;随机分为模型组（Model组）,补肾利咽方高剂量组（BSLY-H组）、补肾利咽方中剂量组（BSLY-M组）、补肾利咽方低剂量组（BSLY-L组）、FTY720组以及洛汀新组（Lotensin组）,每组20只,给予4ml/kg/d药物灌胃6周,采集肾脏、小肠、骨组织。记录大鼠体重及状态变化,死亡情况。2.流式细胞技术检测Peyer小节、小肠固有膜、骨髓中CD19+的IgA分泌细胞（IgA+CD19+）、CD27+的IgA分泌细胞（IgA+CD27+）的表达水平。3.Western Blot法检测骨髓和肾脏组织IgA表达水平。结果:1.与Control组比较,其余各组大鼠出现体重增长缓慢,皮毛偏黄晦暗、脱毛,精神状态萎靡;药物干预后,一般状态好转,体重增加。大鼠共死亡21只。2.流式细胞技术检测Peyer小结、小肠固有膜及骨髓中的IgA+CD19+淋巴细胞与IgA+CD27+淋巴细胞结果显示:与Control组比较,Model组表达显著上升（P＜0.001）。与Model组比较,各给药组表达显著下降（P＜0.001）。各给药组组间比较,BSLY-H组、BSLY-M组、BSLY-L组具有统计学差异（P＜0.001,P＜0.01）,BSLY-H组与FTY720组无统计学差异（P≥0.05）,Lotensin组与BSLY-H组、FTY720组具有统计学差异（P＜0.001）。3.Western Blot法检测结果显示:与Control组比较,Model组骨髓及肾脏IgA表达显著上升（P＜0.001,P＜0.01）。与Model组骨髓及肾脏IgA比较,各给药组表达下降（P＜0.001,P＜0.01,P＜0.05）;骨髓IgA各给药组组间比较,BSLY-M组与BSLY-H组、BSLY-L组无统计学差异（P≥0.05）,BSLY-H组、BSLY-M组与FTY720组无统计学差异（P≥0.05）,Lotensin组与BSLY-H组、FTY720组具有统计学差异（P＜0.01,P＜0.05）。肾脏IgA各给药组组间比较,BSLY-H组、BSLY-M组、BSLY-L组无统计学差异（P≥0.05）,FTY720组、Lotensin组与BSLY-H组、BSLY-M组、BSLY-L组无统计学差异（P≥0.05）。结论:1、IgA分泌细胞增多并分泌大量IgA,最终导致IgA肾病的发生。2.补肾利咽方可以有效降低IgA分泌细胞与IgA的表达,推测补肾健脾、解毒利咽法可能通过抑制IgA分泌细胞从而达到防治IgA肾病的作用。第二章补肾健脾、解毒利咽法干预趋化因子SDF-1、CXCR4对调节淋巴细胞迁移的影响目的:探讨补肾健脾、解毒利咽法干预趋化因子SDF-1与配体分子CXCR4的表达水平,对调节淋巴细胞迁移的影响。方法:1.构建IgA肾病大鼠动物模型,采集大鼠小肠、骨组织。免疫组化法检测小肠组织及骨髓中SDF-1、CXCR4的表达水平。2.Real-time PCR检测Peyer小结、小肠固有膜、骨髓中SDF-1 m RNA的表达水平。结果:1.免疫组化法检测结果显示:与Control组比较,Model组小肠与骨髓SDF-1、CXCR4表达显著下降（P＜0.001,P＜0.001,P＜0.01）。与Model组小肠SDF-1比较,各给药组表达显著上升（P＜0.001）;各给药组组间比较,BSLY-H组、BSLY-M组、BSLY-L组具有统计学差异（P＜0.001）,BSLY-H组与FTY720组具有统计学差异（P＜0.001）,Lotensin组与BSLY-H组、FTY720组具有统计学差异（P＜0.001）。与Model组小肠CXCR4比较,BSLY-H组、FTY720组、Lotensin组、BSLY-M组表达上升（P＜0.001,P＜0.01）,BSLY-L组表达上升,但无统计学差异（P≥0.05）;各给药组组间比较,BSLY-H组与BSLY-M组、BSLY-L组具有统计学差异（P＜0.001）,BSLY-M组与BSLY-L组无统计学差异（P≥0.05）,BSLY-H组与FTY720组具有统计学差异（P＜0.01）,Lotensin组与BSLY-H组、FTY720组具有统计学差异（P＜0.001）。与Model组骨髓SDF-1比较,BSLY-H组、BSLY-M组、FTY720组、Lotensin组表达上升（P＜0.001,P＜0.01）,BSLY-L组表达上升,但无统计学差异（P≥0.05）;各给药组组间比较,BSLY-H组与BSLY-M组、BSLY-L组具有统计学差异（P＜0.001）,BSLY-M组与BSLY-L组无统计学差异（P≥0.05）,BSLY-H组与FTY720组具有统计学差异（P＜0.01）,Lotensin组与BSLY-H组、FTY720组具有统计学差异（P＜0.001）。与Model组骨髓CXCR4比较,各给药组表达上升（P＜0.001,P＜0.01）;各给药组组间比较,BSLY-H组与BSLY-M组、BSLY-L组具有统计学差异（P＜0.001）,BSLY-M组与BSLY-L组无统计学差异（P≥0.05）,BSLY-H组与FTY720组具有统计学差异（P＜0.05）,Lotensin组与BSLY-H组、FTY720组具有统计学差异（P＜0.001）。2.Real-time PCR检测结果显示:与Control组比较,Model组Peyer小结、小肠固有膜、骨髓中SDF-1表达显著下降（P＜0.001）。与Model组Peyer小结SDF-1比较,各给药组表达显著上升（P＜0.001）;各给药组组间比较,BSLY-H组与BSLY-M组、BSLY-L组具有统计学差异（P＜0.001）,BSLY-M组与BSLY-L组无统计学差异（P≥0.05）,BSLY-H组与FTY720组无统计学差异（P≥0.05）,Lotensin组与BSLY-H组、FTY720组具有统计学差异（P＜0.001）。与Model组小肠固有膜SDF-1比较,BSLY-H组、FTY720组、Lotensin组、BSLY-M组表达上升（P＜0.001,P＜0.05）,BSLY-L组表达上升,但无统计学差异（P≥0.05）;各给药组组间比较,BSLY-H组与BSLY-M组、BSLY-L组具有统计学差异（P＜0.001）,BSLY-M组与BSLY-L组无统计学差异（P≥0.05）,BSLY-H组与FTY720组具有统计学差异（P＜0.001）,Lotensin组与BSLY-H组、FTY720组具有统计学差异（P＜0.001）。与Model组骨髓SDF-1比较,BSLY-H组、FTY720组、Lotensin组、BSLY-M组表达上升（P＜0.001,P＜0.01）,BSLY-L组表达上升,但无统计学差异（P≥0.05）;各给药组组间比较,BSLY-H组与BSLY-M组、BSLY-L组具有统计学差异（P＜0.001）,BSLY-M组与BSLY-L组无统计学差异（P≥0.05）,BSLY-H组与FTY720组具有统计学差异（P＜0.01）,Lotensin组与BSLY-H组、FTY720组具有统计学差异（P＜0.001）。结论:1.趋化因子SDF-1与配体分子CXCR4可能并非是导致IgA分泌细胞出现错误迁移并归巢至骨髓的关键分子。2.补肾利咽方可以有效升高小肠组织中SDF-1与CXCR4的表达,推测补肾健脾、解毒利咽法可能通过调节小肠组织中趋化因子SDF-1与配体分子CXCR4的表达及趋化调控紊乱,选择性诱导相关淋巴细胞归巢至次级淋巴器官,从而达到防治IgA肾病的作用。第三章补肾健脾、解毒利咽法对IgA肾病大鼠肾脏组织中TLR4/My D88/NF-κB信号通路的影响及肾脏损伤干预机制目的:探讨补肾健脾、解毒利咽法对IgA肾病大鼠肾脏组织中TLR4/My D88/NF-κB信号通路的分子调控作用及抗肾脏损伤干预机制。方法:1.构建IgA肾病大鼠动物模型,采集大鼠血液样本、肾脏组织。酶联免疫分析法检测大鼠血清IL-6的表达水平。2.Western Blot法检测肾脏组织中TLR4、My D88、NF-κB、IL-6的表达水平。3.免疫组化法检测肾脏组织中TLR4、My D88、NF-κB、IL-6的表达水平。结果:1.酶联免疫分析法检测血清IL-6结果显示:与Control组比较,Model组显著上升（P＜0.001）。与Model组比较,各给药组显著下降（P＜0.001）;各给药组组间比较,BSLY-H组与BSLY-M组、BSLY-L组具有统计学差异（P＜0.001）,BSLY-M组与BSLY-L组具有统计学差异（P＜0.01）,FTY720组、Lotensin组与BSLY-H组无统计学差异（P≥0.05）。3.Western Blot法检测结果显示:与Control组比较,Model组肾脏TLR4、My D88、NF-κB、IL-6表达显著上升（P＜0.01,P＜0.001）。与Model组肾脏TLR4、My D88、NF-κB、IL-6比较,BSLY-H组、FTY720组、BSLY-M组、Lotensin组表达下降（P＜0.01,P＜0.05）,BSLY-L组表达下降,但无统计学差异（P≥0.05）;肾脏TLR4、My D88各给药组组间比较,BSLY-H、BSLY-M组、BSLY-L组无统计学差异（P≥0.05）,FTY720组、Lotensin组与BSLY-H组、BSLY-M组无统计学差异（P≥0.05）;肾脏NF-κB、IL-6各给药组组间比较,BSLY-M、BSLY-H组、BSLY-L组均无统计学差异（P≥0.05）,BSLY-H组与BSLY-L组有统计学差异（P＜0.05,P＜0.01）,FTY720组、Lotensin组与BSLY-H组、BSLY-M组无统计学差异（P≥0.05）。3.免疫组化法检测结果显示:与Control组比较,Model组肾脏TLR4、My D88、NF-κB、IL-6表达显著上升（P＜0.001）。与Model组肾脏TLR4、My D88、NF-κB、IL-6比较,BSLY-H组、FTY720组、BSLY-M组、Lotensin组表达下降（P＜0.01,P＜0.05）,BSLY-L组表达下降,但无统计学差异（P≥0.05）;肾脏TLR4、My D88各给药组组间比较,BSLY-H、BSLY-M组、BSLY-L组无统计学差异（P≥0.05）,FTY720组、Lotensin组与BSLY-H组、BSLY-M组、BSLY-L组无统计学差异（P≥0.05）;肾脏NF-κB、IL-6各给药组组间比较,BSLY-M组与BSLY-H组、BSLY-L组无统计学差异（P≥0.05）,BSLY-H组与BSLY-L组有统计学差异（P＜0.05）,FTY720组、Lotensin组与BSLY-H组、BSLY-M组、BSLY-L组无统计学差异（P≥0.05）。结论:1.抗原激活TLR4/My D88/NF-κB信号通路,并促使下游细胞因子IL-6表达升高,从而引起IgA肾病肾损伤的发生。2.补肾利咽方可以有效降低血清IL-6的表达,有效降低肾组织内TLR4、My D88、NF-κB、IL-6的表达。推测补肾健脾、解毒利咽法可能通过阻断肾组织内TLR4/My D88/NF-κB信号通路的表达,从而达到防治IgA肾病及抗肾损伤的作用。