目的:微小RNA(microRNA,miRNA)是一类小分子非编码RNA,它通过调控目标基因表达水平参与到多种生理、病理过程。miRNA在肿瘤发生发展中通过扮演癌基因或抑癌基因角色发挥着重要作用。课题组前期研究发现中药复方养正散结汤能显著抑制胃癌细胞的增殖、促进其凋亡。本研究拟在此基础上,进一步探索养正散结汤对胃癌细胞miRNA的影响,以及抑癌性miRNA介导养正散结汤发挥抑癌作用的潜在分子机制。方法:1.miRNA芯片检测经养正散结汤含药血清处理后SGC-7901细胞的miRNA表达谱,与对照组比较。2.筛选出代表性抑癌性miRNA let-7a和miR-7,利用q RT-PCR法在AGS、SGC-7901、HS-746T、MKN-45细胞中验证养正散结汤含药血清对其表达影响。3.利用miRNA mimic及inhibitor过表达或抑制miR-7表达,cck-8法检测其对胃癌细胞AGS和MKN-45细胞增殖的影响,划痕愈合实验检测其对胃癌细胞AGS迁移的影响。4.WB检测经养正散结汤含药血清和对照组处理后let-7a靶标c-Myc、Ras的表达,miR-7靶标EGFR的表达,比较两组表达差异。结果:1.miRNA表达谱经养正散结汤含药血清处理后发生改变,多个miRNA经养正散结汤处理后上调或下调。2.经养正散结汤含药血清处理后,抑癌性miRNA let-7a和miR-7在胃癌细胞株AGS、SGC-7901、HS-746T和MKN-45中的表达量较对照组显著上调(P<0.05)。3.miR-7抑制胃癌细胞的增殖和迁移(P<0.05)。4.养正散结汤含药血清处理胃癌细胞后其let-7a靶蛋白c-Myc、Ras的表达明显下调,miR-7靶蛋白EGFR的表达明显下调(P<0.05)。结论:养正散结汤能调控胃癌细胞miRNA表达谱,抑癌性miRNA let-7a和miR-7经养正散结汤处理后显著上调,let-7a抑制下游靶基因c-Myc、Ras表达,miR-7抑制下游靶基因EGFR表达,可能是抑癌性miRNA let-7a和miR-7介导养正散结汤抑制胃癌细胞生长的分子机制。