目的：观察精子中是否存在孕酮受体(PR)和环磷酸腺苷应答元件调节器(CREM)的mRNA，同时观察精子中的mRNA水平与精子活力和形态是否相关。 　　方法：取9个正常人的精液，分别采用上游法和Percoll(40％/80％)分离精子，取出上游出来的精子和80％层的精子，在显微镜下观察，初步确定没有别的细胞污染后，提取精子中的RNA。由于精子中可能污染白细胞、睾丸未成熟生殖细胞和脱落上皮细胞，本实验采用RT-PCR的方法，对上述细胞特异表达的基因进行扩增：利用CD45基因检测白细胞污染、c-kit基因检测未成熟生殖细胞污染，E-cadherin基因检测上皮细胞污染；实验过程中同时设立阳性阴性对照。在确认分离的精子中没有上述细胞污染后再进行目的基因进行扩增。为了进一步确认RNA提取成功与否，本实验还对精子特异表达的鱼精蛋白基因(P2)进行扩增，P2基因的引物设计是跨外显子的，所以P2的扩增还可以排除RNA中的DNA的污染。在确保精子中无别的细胞污染，提取的RNA中无DNA污染的前提下，对PR和CREM进行扩增，并以GAPDS基因作为参照基因，对PR和CREM基因的mRNA水平进行半定量分析：采用ImageMaster2DElite软件分析PCR电泳条带吸光度容积，计算目的基因RT-PCR产物吸光度容积与GAPDS吸光度容积的比值，作为目的基因mRNA的相对含量，比较两种分离方法得到的精子中的两个基因的mRNA水平是否有差异。结果采用SPSS软件进行配对t检验。 　　结论：本实验是首次证实了精子中存在CREM基因的RNA，精子中的PR的mRNA水平与精子活力和形态相关。