反复丙泊酚麻醉对新生鼠海马神经元凋亡及远期空间学习记忆能力的影响

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目的:探讨反复丙泊酚麻醉对新生鼠海马神经元凋亡及远期空间学习记忆能力的影响。方法:新生7 d SD雄性大鼠112只随机数字表法分为8组(n=14只)。对照组1(Con1组),腹腔连续注射5d生理盐水。P50组、P100组、P150组:分别连续5d腹腔注射50mg/kg、100 mg/kg和150 mg/kg丙泊酚。对照组2(Con2组),腹腔连续注射5d生理盐水,最后1天在丙泊酚麻醉下行阑尾切除术。SP50组、SP100组和SP150组:分别连续5d腹腔注射50mg/kg、100 mg/kg和150 mg/kg丙泊酚,最后1天在丙泊酚麻醉下行阑尾切除术。8组大鼠饲养2个月后选用Morris水迷宫行为学实验,实验结束后取大鼠脑第五段的海马结构,使用免疫组化法测定海马Caspase-3、Bax、Bcl-2的表达。除了大鼠脑第五段海马结构之外的脑组织制备成10%匀浆,收集上清液。通过液相悬浮芯片法和Western Blot测定脑组织IL-1β、IL-6、IL-10、TNF-α水平。结果:与对照组(Con1)比较,P50、P100、P150各组caspase-3、Bax表达逐渐升高(p<0.05),Bcl-2表达逐渐降低(p<0.05)。与P50组比较,P100、P150组caspase-3、Bax表达升高(p<0.05);Bcl-2表达逐渐降低(p<0.05)。与对照组(Con2)比较,SP50、SP100、SP150各组caspase-3、Bax表达逐渐升高(p<0.05),Bcl-2表达逐渐降低(p<0.05)。与SP50组比较,SP100、SP150组caspase-3、Bax表达升高(p<0.05),Bcl-2表达逐渐降低(p<0.05)。Morris水迷宫测试中,与对照组(Con1)比较,P50、P100与P150组逃避潜伏期逐渐延长(P<0.05),P50组穿越平台次数没有明显差异(P>0.05),P100与P150组穿越平台次数明显减少(P<0.05),与对照组(Con2)比较,SP50组逃避潜伏期无统计学差异(P>0.05),SP100与SP150组逃避潜伏期明显延长(P<0.05),与SP50组比较,SP100与SP150组潜伏期也明显延长(P<0.05),与对照组(Con2)比较,SP50组穿越平台次数无统计学差异(P>0.05),SP100与SP150组穿越平台次数减少(P<0.05)。在细胞因子测定中,与对照组(Con1)比较,P50组IL-1β、IL-6、TNF-α水平无统计学差异(P>0.05),IL-10水平升高(P<0.05),P100、P150各组IL-1β、IL-6、IL-10、TNF-α水平升高(P<0.05),与对照组(Con2)比较,SP50组IL-1β、IL-6、IL-10、TNF-α水平无统计学差异(P>0.05),SP100、SP150各组IL-1β、IL-6、IL-10、TNF-α水平升高(P<0.05)。结论:在脑生长高峰时期反复低剂量丙泊酚麻醉不会引起明显的海马神经元凋亡、促炎因子释放、远期空间学习记忆能力受损。反复中高剂量的丙泊酚麻醉会引起明显的海马神经元凋亡、促炎因子释放和远期空间学习记忆能力受损,且呈剂量相关性。
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