山苍子雌花和雄花精油成分分析及生物活性研究

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山苍子(Litsea cubeba(Lour.)Pers)是樟科(Lauraceae)木姜子属(Litsea)雌雄异株植物,在我国主要分布在长江以南地区,是我国南方重要经济、香料树种。对于山苍子的研究主要集中在山苍子果实精油成分分析提纯及生物活性测定等方面,但对于山苍子花精油系统的活性成分及抗氧化性、抑菌性等研究较少。本研究选取山苍子雌花和雄花为实验材料,采用水蒸气蒸馏法分别提取山苍子雌花和雄花精油,并对山苍子雌花和雄花精油的化学成分进行分析研究。采用还原力测定、清除DPPH自由基能力测定和清除羟自由基能力测定三种不同方法分别检测山苍子雌花和雄花精油的抗氧化活性。同时,对山苍子雌花和雄花精油抑菌活性进行测定,采用滤纸片法测定精油对六种供试细菌的抑制作用。最后通过测定山苍子雌花和雄花精油对紫色杆菌CV026紫色杆菌素及对铜绿假单胞菌生物被膜产生和浮游运动的抑制作用,分析研究山苍子雌花和雄花精油对细菌群体感应的抑制活性。主要试验结论如下:1.采用GC-MS对山苍子雌花和雄花精油的化学成分分析,表明山苍子雌花精油鉴定出的化合物总数比雄花精油多,但多出的化合物相对含量较低。从山苍子雌花和雄花精油中分别鉴定出47和43种化合物,其中山苍子雌花和雄花精油相对含量较多的化学成分是相同的九种化合物:β-水芹烯、柠檬烯、桉油精、β-蒎烯、α-蒎烯、松油烯、(-)-4-萜品醇、松油醇、乙酸松油酯。2.采用体外抗氧化活性测定评价法,利用比色法,通过还原力的测定,计算精油清除羟自由基、DPPH自由基的清除率的大小来对山苍子雄花和雌花精油抗氧化活性进行测定,不同测定抗氧化活性方法的作用机理有所不同,三种抗氧化方法结果存在略微差异。但总体趋势上,山苍子雌花精油的抗氧化要微强于山苍子雄花精油。同时试验结果表明,在低浓度下,山苍子雌花和雄花精油抗氧化活性较弱,随着精油浓度的增加,其抗氧化活性逐渐增强。3.山苍子雌花和雄花精油对金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、铜绿假单胞菌、大肠杆菌、粘质沙雷氏菌H30、粘质沙雷氏菌MG1均具备较好的抑菌活性,对这几种菌的抑制效果,金黄色葡萄球菌>枯草芽孢杆菌>铜绿假单胞菌>大肠杆菌>粘滞沙雷氏菌MG1=粘质沙雷氏菌H30。研究还发现山苍子雌花和雄花精油对粘滞沙雷氏菌H30具有抑菌作用的同时对其菌灵红素的产生具有强烈的抑制作用。4.采用滤纸片法和OD值测定法测定紫色杆菌CV026紫色杆菌素产量,表明山苍子雌花和雄花精油能够显著抑制紫色杆菌素的产生。通过OD值测定和光学显微镜观察,表明山苍子雌花和雄花精油具有较强的抑制铜绿假单胞菌生物膜形成的作用,且抑制作用随着精油浓度的增加而增强。铜绿假单胞杆菌浮游试验表明山苍子雌花和雄花精油能够抑制铜绿假单胞杆菌的群集运动,其抑制率分别为67.41%和 50.27%。
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