目的:酸性微环境通过诱导上皮间质转化促进胰腺癌的侵袭转移,但是其具体机制还未研究清楚。酸敏感离子通道(ASICs)在许多酸性环境相关的生理和病理过程中都有着至关重要的作用,所以本论文研究在胰腺癌中ASIC1/3是否参与了酸性微环境诱导的上皮间质转化。方法:使用定量反转录聚合酶链式反应(qRT-PCR)、免疫荧光、免疫组化技术检测胰腺癌组织和癌旁组织中ASIC1/3的表达。使用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)、qRT-PCR、蛋白质印迹(Western blot)技术检测胰腺癌细胞系(PANC-1、SW1990、BxPC-3、AsPC-1)和正常胰腺导管细胞(HPDE)中ASIC1/3的表达。膜片钳技术检测酸性微环境对胰腺癌细胞电流的影响。体内和体外实验研究ASIC1/3对酸性微环境诱导的侵袭、迁移、上皮间质转化的影响。通过钙影像技术检测细胞内钙离子浓度([Ca2+]i)的变化。检测RhoA的活性以研究其在ASIC1/3-[Ca2+]i通路中的作用。使用小RNA干扰技术(siRNA)或者相关药理抑制剂研究在胰腺癌中[Ca2+]i和RhoA对酸性微环境诱导的上皮间质转化的影响。结果:ASIC1和ASIC3定位于胰腺癌细胞膜,介导酸性微环境诱导的内向电流,并且此电流可被阿米洛利抑制。在酸性微环境下抑制ASIC1和ASIC3可减弱胰腺癌细胞的侵袭、转移和上皮间质转化。酸性微环境可刺激细胞内钙离子浓度的升高,进而激活RhoA,当ASIC1和ASIC3被抑制时,此效应减弱。钙离子螯合剂BAPTA-AM和沉默RhoA的表达可抑制酸性微环境诱导的上皮间质转化。在裸鼠皮下种植瘤模型中,敲除ASIC1或ASIC3的表达显著抑制胰腺癌细胞的肝转移和肺转移。相比较于癌旁组织,在胰腺癌组织中ASIC1和ASIC3呈高表达,并且ASIC1/3的表达与上皮样细胞标志E-cadherin和间质样细胞标志Vimentin的表达相关联。结论:ASIC1和ASIC3作为一种“感受器”,通过升高细胞内钙离子浓度和RhoA活性将酸性微环境信号传递到细胞内,从而促进胰腺癌细胞的上皮间质转化。本论文阐述了一个完整的信号通路来解释酸性微环境对胰腺癌细胞侵袭转移的影响机制。