肾癌是泌尿系最常见的肿瘤之一，其发病机制不清，治疗效果不十分理想，常规保守治疗(放疗、化疗和免疫治疗)疗效欠佳，有统计资料表明近20年来，有关肾癌的治疗未取得突破性进展。随着生物学不断发展，人们认为，细胞凋亡与肿瘤的发生、发展与治疗关系密切，细胞恶变不仅是由于细胞增殖的增加，也可以是细胞凋亡的减少所致，细胞凋亡的减少可能有助于肿瘤的发生和发展并影响其化放疗疗效。Fas、FasL作为细胞凋亡信号传递的重要环节，在细胞的恶变及治疗过程中发挥重要的作用。化疗是肿瘤综合治疗中重要措施之一，恶性肿瘤表现出来的耐药性一直是化疗失败的主要原因，多药耐药(MDR)是肿瘤化疗中存在的普遍现象，各国学者对肿瘤细胞的MDR现象进行了广泛深入的研究。肾癌是临床上最容易产生耐药的肿瘤之一，对化疗不敏感。如何提高肾癌的疗效目前仍缺乏理想的方法，因此，肾癌细胞耐药机制的研究成为亟待解决的问题。目前研究证实P-糖蛋白(P-gp)过度表达以及谷胱甘肽依赖性解毒酶系统活性增高在介导肾癌对化疗药物的耐受过程中发挥了重要作用，但上述因素并非是化疗药物耐药的唯一途径。肿瘤细胞对凋亡的耐受是MDR的一个新机制，诱导肿瘤细胞凋亡可能是不同化疗药物殊途同归的结果。在细胞凋亡与肿瘤耐药的研究中，最引人注目的是Fas/FasL途径在肿瘤耐药中的作用，研究表明该途径在化疗药物诱导敏感的白血病细胞株、肝癌细胞株及黑色素瘤凋亡中发挥重要作用，但Fas/FasL凋亡途径在肾癌细胞耐药中的作用，目前研究甚少。本实验采用免疫组织化学方法检测肾癌组织及远离癌的正常肾组织中Fas、FasL的表达，分析其在肾癌组织中的表达特点；同时运用免疫细胞化学、Western blot、RT-PCR及TUNEL、电镜等技术，检测肾癌细胞株786-0在化疗药物5-氟尿嘧啶(5-FU)作用下Fas、FasL的表达变化，分析5-FU、抗Fas单抗CH11、中和性抗FasL单抗NOK-2对癌细胞凋亡与增殖活性的影响。初步探讨了Fas/FasL途径在肾癌细胞耐药中的作用，以期为克服肾癌耐药提供新的启示。主要结果：1、肾癌组织Fas阳性表达率显著低于正常肾组织，肾癌组织FasL阳性表达率显著高于正常肾组织；正常肾组织Fas和FasL表达具有相关性,肾癌组织的Fas和FasL<WP=8>表达无相关性。2、Fas、FasL蛋白表达率在各病理分型及临床分期之间比较无显著差异；在肾癌的各病理分级之间，随肾癌细胞分级的增加，Fas蛋白表达率逐渐降低，FasL蛋白表达率逐渐增高，统计学分析有显著差异；有淋巴结转移组FasL蛋白表达率与无淋巴结转移组之间比较显著升高，而Fas蛋白表达率无显著差异。3、Fas、FasL蛋白产物在肾癌细胞786-0中均有表达，主要位于细胞浆及细胞膜，未见核内表达；786-0细胞在不同浓度5-FU作用后，于不同时相点检测可见Fas、FasL蛋白及mRNA表达显著升高，低、中剂量呈时间-剂量依赖关系，中等剂量5-FU 70ug/ml(临床相关血药浓度)作用肾癌细胞株48小时Fas、FasL的表达最显著。4、肾癌细胞786-0在化疗药物5-FU作用下，细胞增殖活性显著降低，细胞凋亡指数显著增加，透射电镜观察可见细胞凋亡现象和凋亡小体形成。5、抗Fas单抗CH11(激动剂)作用于肾癌细胞786-0后，细胞凋亡指数有显著增加，增殖活性显著降低；CH11与5-FU共同作用于786-0细胞可显著抑制细胞增殖，诱导细胞凋亡，与CH11或5-FU单独作用相比均有显著差异。 6、抗FasL单抗NOK-2作为中和抗体阻断肾癌细胞786-0 FasL与Fas相互作用后，在5-FU作用下，细胞的凋亡指数及增殖活性均无显著变化，中和性抗FasL单抗NOK-2不能阻断5-FU所诱导的细胞凋亡。主要结论：1、肾癌组织低表达Fas、高表达FasL，Fas和FasL蛋白表达异常及相互作用失衡可能在肾癌的发生、发展中起重要作用。2、Fas、FasL蛋白的表达情况与肾癌的临床分期与病理分型无关，与肾癌病理分级及淋巴结转移有一定关系。3、抗Fas单抗可有效诱导肾癌细胞786-0凋亡，抑制细胞增殖，肾癌细胞株786-0 中Fas途径介导的细胞凋亡是存在的；肾癌细胞786-0在化疗药物5-FU作用下Fas、FasL的mRNA及蛋白表达均增加，然而，5-FU通过Fas/FasL之外的途径诱导了肾癌细胞凋亡，而未能有效激活Fas/FasL凋亡途径，该凋亡途径的失活可能是肾癌耐药的另一重要因素，其机制有待于进一步研究。