秋水仙碱对兔耳增生性瘢痕影响的实验研究

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目的建立稳定的兔耳增生性瘢痕模型,通过计算瘢痕生长指数,观察瘢痕形态学变化,测定不同时间瘢痕组织中羟脯氨酸(Hpr)含量的变化以及基质金属蛋白酶-1及其抑制剂的表达情况,以阐明秋水仙碱对增生性瘢痕的治疗作用,为秋水仙碱能有效、安全地应用于增生性瘢痕的治疗提供实验基础与理论支持。方法新西兰大白兔16只,雌雄不拘,体重为(2.3±0.2)kg,兔耳健全,在动物实验中心适应性饲养1周。速眠新麻醉后,在兔耳腹侧长轴上,作直径为1cm大小的圆形创面,切除皮肤全层,彻底刮除软骨膜,每耳制作创面6处,共192个创面。用随机数字表法把16只大白兔随机分为4组,分别为:A组(生理盐水对照组),B组(秋水仙碱0.15㎎?ml),C组(秋水仙碱0.30㎎?ml),D(秋水仙碱0.60㎎?ml)。术后第7d,开始向创面基底部及创面灶内局部注射生理盐水或不同浓度的秋水仙碱溶液,每个创面注射50ul,每7天注射一次,共7次,在术后第28天和56天,分别随机切取标本,用HE染色,光镜下观察标本的组织学改变,测定瘢痕生长指数(HI),氯胺T法检测标本中的羟脯氨酸(Hpr)的含量变化,采用免疫化检测两个不同时间点标本中基质金属蛋白酶-1(MMP-1)及基质金属蛋白酶-1抑制剂(TIMP-1)的表达情况。结果1.HE染色显示,实验组较对照组真皮层变薄,成纤维细胞数量减少,胶原纤维排列也较规则,无明显炎性细胞。2.HI测定结果显示实验组较对照组显著降低。3.羟脯氨酸含量实验组较对照组均显著降低,差异有统计学意义(P<0.05)。4.MMP-1及TIMP-1的表达实验组较对照组显著降低,各组之间分别相比,差异有统计学意义(P<0.05)。结论应用秋水仙碱局部注射对兔耳增生性瘢痕有明显的抑制作用,其原因可能与通过抑制成纤维细胞的增殖和减少胶原的合成有关。
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