基于多糖的双模态纳米探针的构建及其在胰腺癌成像中的应用

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肿瘤早期诊断是改善预后的关键。为了获得全面准确的疾病信息,可将两种或多种成像模式联合使用。本课题构建两种基于多糖的双模态纳米探针,将磁共振成像(MRI)与荧光成像(FI)联合使用,优势互补,既能提供高分辨率的结构组织学信息,又能实现高灵敏度的功能学显像,极具发展前景。  目的:  构建两种基于多糖的双模态纳米探针,并试用于胰腺癌的双模态成像。  方法:  用硬脂酸(SA)和肉豆蔻酸(MA)分别对葡聚糖(DEX)和壳聚糖(CS)进行疏水改性,进而嫁接钆螯合物(DTPA-Gd)和异硫氰酸荧光素(FITC),考察产物的化学组成、疏水基团和FITC的接枝率。产物溶于水中形成胶束,在内核包载近红外荧光染料(IR-780),得到两种双模态纳米探针(FITC-DEXSA-DTPA-Gd/IR-780和FITC-CSMA-DTPA-Gd/IR-780)。考察纳米探针的粒径和Zeta电位、微观形态、载药量和包封率、体外释放行为,肿瘤细胞摄取行为与细胞毒性,以及在荷瘤动物中的MRI和FI效果。  结果:  FITC-DEXSA-DTPA-Gd和FITC-CSMA-DTPA-Gd中SA的取代度为8.35%,MA的取代度为9.80%,钆含量分别为0.53 mmol/g和0.71 mmol/g,FITC的标记效率分别为1.5%和2.0%。FITC-DEXSA-DTPA-Gd/IR-780和FITC-CSMA-DTPA-Gd/IR-780的流体动力学粒径分别为128.80 nm和191.00 nm,电位分别为-1.91 mV和25.72 mV,形态近似球形,IR-780的包封率分别为88.54%和97.27%,载药量分别为0.19%和0.27%,在PBS中48h内均没有明显的释放。两种双模态纳米探针对人胰腺癌细胞MIA PaCa-2没有明显毒性,均可被MIA PaCa-2细胞摄取。FITC-DEXSA-DTPA-Gd/IR-780和FITC-CSMA-DTPA-Gd/IR-780的体外弛豫率分别为10.19 mM-1s-1和14.69 mM-1s-1,均高于市售小分子磁共振对比剂马根维显(5.01 mM-1s-1)。MRI结果显示两种双模态纳米探针可使肿瘤的边缘呈现地更清晰,成像效果优于马根维显;FI结果显示两种双模态纳米探针对裸鼠肿瘤组织均具有良好靶向性,肿瘤处荧光明显。  结论:  本文构建的两种基于多糖的双模态纳米探针均能够显著提高肿瘤的磁共振成像效果,同时在肿瘤组织呈现较强荧光,提高了诊断的准确性。
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