目的 观察携带人干扰素α(IFN-α)基因的X基因缺陷的HBV DNA真核表达质粒在真核细胞中的复制表达效果。 方法 将构建成功的目的质粒(携带IFN-α基因的X基因缺陷的HBV DNA真核表达载体pcDNA3-KN-F1F2-IFN-α)以及作为对照的三种质粒(克隆双拷贝全长HBV基因组的真核表达质粒pcDNA3-ES-HBV2、X基因缺失的真核表达质粒pcDNA3-KN-F1F2和空载体pcDNA3)，用阳离子脂质体转染的方法，分别转染肝癌细胞HepG2，用荧光定量PCR法、ELISA法检测HBV的复制表达水平；ELISA法、RT-PCR法检测IFN-α表达水平。 结果 1．建立目的重组病毒KN-F1F2-IFN-α的持续复制表达系统HepG2／KN-F1F2-IFN-α；2．X基因缺失的乙肝病毒(KN-F1F2)较之全长基因组的乙肝病毒(ES-HBV2)复制表达水平降低，而目的重组病毒KN-F1F2-IFN-α的复制表达水平较之ES-HBV2以及KN-F1F2均降低：3．插入的IFN-α片段可以在mRNA以及蛋白质水平表达，最高表达量为134±25.87pg／ml，分泌周期大于2周。 结论1．携带人IFN-α基因的X基因缺陷的HBV基因组可以在体外培养的HepG2细胞中产生包装病毒并持续表达；2．重组HBV介导的IFN-α可以在体外培养的HepG2细胞中转基因表达；3．HBV可以被改造用作基因转移的病毒载体。