论文部分内容阅读
益生菌作为一种饲料添加剂,在畜牧业生产中得到越来越广泛的应用,其饲喂效果也得到了畜牧从业者和学者的广泛认可。但益生菌的益生特性表现出较为明显的菌株差异,因此要得到益生性能优良的益生菌株,就要进行大量的筛选工作。实验室前期分离保存了一株具有高胆盐耐受特性的益生菌,本课题对该株益生菌的种属、益生特性及安全性进行了系统的研究。具体研究内容及结果如下:(1)通过形态学观察、生化鉴定及16S rDNA序列比对分析,确定该菌株为屎肠球菌(Enterococcus faecium),并命名为屎肠球菌SQ-1。(2)对该株菌开展了体外益生特性研究,实验结果表明:SQ-1具有较好的耐酸、耐胆盐、耐高温、耐消化酶等特性。在p H2.0的条件下培养3h仍有61.93%的存活率;在胆盐浓度为0.3%的条件下培养3h有90.37%的存活率,胆盐浓度达0.6%时仍有49.7%的存活率;在60℃环境中处理15min仍有77.66%的存活率;经过1.2%的胰蛋白酶处理3h后有31.01%的存活率。这些实验结果表明该株菌具有较好的抗逆性,且对高浓度胆盐的耐受性较为突出。采用碳氢化合物黏着法检测该菌的疏水性,结果表明SQ-1疏水率为34.53%,具有中等疏水性。在对沙门氏菌(CVCC 3377)和金黄色葡萄球菌(CICC23926)的抑菌实验中,抑菌圈直径分别为11mm和13mm,具有中等抑菌作用。(3)进行了SQ-1对小鼠单核-巨噬细胞吞噬功能和血清中IgG、IL-2含量影响的研究。碳粒廓清实验结果表明,口服1×109cfu/mL的屎肠球菌SQ-1组与对照组比较,廓清指数出现显著性(P<0.05)升高,表明该菌株对小鼠的吞噬功能具有显著的增强作用;血清中IgG含量检测结果显示,口服1×109cfu/mL的屎肠球菌SQ-1组与对照组相比较,IgG含量有极显著性(P<0.01)升高;而IL-2含量无显著性差异。这些实验结果,说明屎肠球菌SQ-1对小鼠的免疫功能具有增强作用。(4)对屎肠球菌SQ-1开展了安全性研究,实验包括:对20种抗生素敏感性检测、毒力基因PCR检测和小鼠口服屎肠球菌SQ-1后的脏器指数、血常规检测以及组织切片观察等。抗生素敏感性实验结果表明,屎肠球菌SQ-1对8种抗生素敏感,其中最具有代表性的万古霉素抑菌圈直径为19mm;对常见的六种毒力基因(Asa1、cyl A、efaA、esp、gel E、hyl)的PCR检测结果表明,屎肠球菌SQ-1不存在这六种毒力基因。在口服屎肠球菌SQ-1的安全性研究中,实验组和对照组相比较,脏器指数和血常规检测均无显著性差异;组织切片观察显示无病理变化,上述的安全性实验结果表明,屎肠球菌SQ-1的安全性较高。综上所述,屎肠球菌SQ-1具有较好的抗逆性和益生特性,同时安全性较好,这些为该菌株的生产开发提供了理论依据,也说明了该菌株有较好的应用前景。