瓜类细菌性果斑病（Bacterial fruit blotch,BFB）是由西瓜噬酸菌（Acidovorax citrulli,Ac）引起的、主要侵染西瓜、甜瓜等葫芦科作物的种传细菌性病害,在植物各个生长期均可侵染和为害,具有传播速度快和发病重等特点,极大地限制了瓜类产业的持续健康发展。在细菌生长、繁殖甚至致病过程中,铁是必需的金属元素,但若细胞内铁离子过量,会参与Fenton和Haber-Weiss反应而产生大量有毒的羟自由基等,损伤细胞甚至导致死亡,因此细菌必须严格调节铁离子水平,该功能主要由铁吸收调控蛋白Fur负责调控。经生物信息学分析,西瓜噬酸菌中存在两个铁吸收调控蛋白FurA和FurB,为探究其在西瓜噬酸菌中的生物学功能,本文以西瓜噬酸菌Aac5为研究对象,构建基因furA和furB单突变菌株ΔfurA、ΔfurB和双突变菌株ΔfurAΔfurB,以及各自对应的互补菌株,并对以上突变和互补菌株进行了致病性和其他相关表型测定,采用实时荧光定量对致病、铁代谢和应激相关基因进行了表达量分析。结果如下:（1）获取了西瓜噬酸菌FurA、FurB的相关生物学信息铁吸收调控因子FurA和假定铁吸收调控因子FurB均具有FUR结构域和DNA结合位点,属于Fur家族成员,并FurA中存在两个金属结合位点。FurA与青枯雷尔氏菌（Ralstonia solanacearum）的亲缘关系较近,FurB蛋白与枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）的亲缘关系较近。（2）构建了试验突变和互补菌株,并测定其致病力和其他相关生物学表型成功构建突变菌株ΔfurA、ΔfurB和ΔfurAΔfurB,以及各自对应的互补菌株。表型测定结果显示:与野生菌株相比,ΔfurA和ΔfurAΔfurB均能引起烟草过敏性反应,致病力、运动能力、铁载体产生及生长能力均显著下降,生物膜形成能力显著增强,对过氧化氢和链黑菌素敏感性显著提高,互补菌株能够恢复部分表型;ΔfurB、ΔfurBcomp丧失了致病力和烟草过敏性反应能力,ΔfurB的生物膜形成能力、铁载体产生和生长能力显著下降,运动能力增强,对过氧化氢和链黑菌素敏感性无差异,其互补菌株部分恢复。测定各菌株在不同金属离子(Fe³⁺、Cu²⁺、Zn²⁺、Mn²⁺、Ca²⁺、Mg²⁺)浓度的生长能力,发现Fe³⁺、Zn²⁺、Mn²⁺、Cu²⁺、Mg²⁺和Ca²⁺浓度影响ΔfurA的生长能力,ΔfurB在不同Zn²⁺、Mn²⁺、Cu²⁺浓度下生长能力有所变化,ΔfurAΔfurB在不同Fe³⁺、Zn²⁺、Mn²⁺浓度下生长能力与ΔfurA有差异。以上结果表明FurA和FurB在致病力、生物膜和铁载体形成能力和离子稳态等方面具有重要作用。（3）验证了furA、furB缺失后,影响Ac的致病、铁代谢和应激相关基因的表达ΔfurA和ΔfurAΔfurB中,除了hrpG在ΔfurA中显著提高而在ΔfurAΔfurB中显著降低外,hrpG、virB、cheA、bamH、tdsR、ftn、sod、σ²⁴和σ⁵⁴表达量均显著提高,而pilA、bfr和σ²⁸表达量均下降;ΔfurB中,hrpX、cheA、fliC、cat、σ²⁴和σ⁵⁴表达量均提高,而virB、ftn、tdsR和σ²⁸表达量显著下降,基因furA、furB分别在ΔfurB和ΔfurA中表达量都显著提高。分析表明,furA和furB都不同程度地调控以上基因表达,且furA在影响virB、pilA、ftn、bfr、tdsR和sod表达中作用更显著,并且两个基因在转录水平上呈负相关关系。