【摘 要】
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我们用免疫组化标记、电镜和FM1-43荧光成像技术等方法证明在急性分离的SCG神经元胞体上存在突触终扣.结合碳纤电极(CFE,可以用来实时地记录量子化分泌的电流信号),fura-2(测
【出 处】
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中国科学院上海生命科学研究院神经科学研究所 中国科学院神经科学研究所 中国科学院上海生命科学研究院
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我们用免疫组化标记、电镜和FM1-43荧光成像技术等方法证明在急性分离的SCG神经元胞体上存在突触终扣.结合碳纤电极(CFE,可以用来实时地记录量子化分泌的电流信号),fura-2(测钙信号)和FM1-43(观测突触)等方法,我们发现并证明了在单个突触终扣上存在有钙库,并进一步研究了其功能.IP3敏感和RyR敏感的钙库可以诱导量子化肾上腺素分泌,我们发现这些肾上腺素是从附着在胞体上的突触终扣分泌来的,而不是来自于胞体.ATP是中枢和外周神经系统中的一种快速神经递质,结合CFE、膜片钳和钙成像技术我们研究了ATP诱导的突触终扣量子化释放.ATP诱导的分泌是由P2X受体通道本身的钙离子内流引起的,而不依赖于电压依赖性钙通道和胞内钙库;P2Y/G-蛋白诱导的胞内钙库释放不能引起量子化释放,但它们可以调节由ATP产生的分泌.我们主要研究了BmP05和MartenToxin等蝎毒素的结构和功能的关系,主要结果如下:BmP05可以专一性阻断SKCa通道;通过研究BmP05突变体对通道的阻断作用,我们发现N末端α螺旋区域内的第6和13位的赖氨酸和精氨酸对毒素与SKCa的相互作用起必要和协同的作用,而C-末端的连接两个β-折叠的β-转角是负责毒素作用的专一性.
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