论文部分内容阅读
蜜蜂工蜂的上颚腺是分泌蜂王浆中重要成分10-羟基-2-癸烯酸(10-hydroxy-2-decenoicacid,10-HDA)的唯一腺体。关于蜜蜂上颚腺分泌物的研究已有较多文献报道,而对于工蜂上颚腺中10-HDA合成的脂肪酸代谢机制研究较少。脂肪酸合成过程中脂肪酸合成酶(fatty acid synthase,FAS)作为关键酶起到至关重要的作用。为了了解工蜂上颚腺内与10-HDA合成相关的基因,以及其表达调控规律。我们在前期iTRAQ的基础上,通过荧光定量PCR方法,测定不同日龄意大利蜜蜂(以下简称意蜂)成年工蜂上颚腺中的fas、hsp70、mrjp1、mrjp3、trme9等基因的相对表达水平,并就保幼激素类似物(JHA)、食物等因素对fas等基因的表达影响进行研究,主要结果如下:(1)分别对0及10日龄的中华蜜蜂(以下简称中蜂)和意蜂工蜂上颚腺中8个候选基因进行表达分析比较,结果表明,10日龄中蜂上颚腺中5个基因,fas、fp1、hsp70、mrjp1、mrjp3相对表达水平显著高于0日龄,3个基因bala、ddcp、trme9显著低于0日龄;而10日龄意蜂工蜂上颚腺中仅4个基因,fas、hsp70、mrjp1、mrjp3比0日龄的表达水平显著高,1个基因trme9仍显著低。因此推测,5个共同的差异表达基因与10-HDA合成可能存在重要相关关系。(2)分别对0、5、10、15、20、25日龄意蜂成年工蜂上颚腺中fas、mrjp1、mrjp3基因的相对表达水平进行测定。结果显示,0至25日龄间,mrjp1、mrjp3的相对表达水平均显著高于0日龄,fas基因在0至15日龄间与10-HDA的增加趋势相仿。推测,3个基因与10-HDA合成可能有重要相关关系。(3)给意蜂工蜂分别饲喂50%蔗糖液+花粉、龙眼蜜+花粉、桉树蜜+花粉、50%蔗糖液、龙眼蜜、桉树蜜,并对0、5、10、15日龄工蜂上颚腺中fas、mrjp1、mrjp3的表达进行检测,结果表明,0日龄工蜂上颚腺中fas相对表达水平显著低于5、10、15日龄;不同日龄,不同的糖类、或有无花粉的供应,对上颚腺中fas、mrjp1、mrjp3基因表达是有影响的,但具体影响并不完全一致。如5日龄时,蔗糖液组工蜂上颚腺中fas、mrjp3表达极显著高于蔗糖液+花粉组(P<0.05),显示此时花粉可能抑制了两种基因的表达,或者缺粉时其在上颚腺的表达增高。不同饲料组工蜂上颚腺10-HDA含量测定发现,随日龄增大工蜂上颚腺中10-HDA含量不断升高。相应的fas表达水平较高的工蜂上颚腺10-HDA含量也相对较高,但不同饲料饲喂后对上颚腺10-HDA含量无显著影响。(4)50 μg/bee和200 μg/bee的JHA处理0日龄意蜂工蜂后,在3、5、9日龄时上颚腺中fas相对表达水平极显著高于0日龄(P<0.01)。200 μg/bee JHA处理后5日龄工蜂上颚腺中fas相对表达水平即显著高于50μg/beeJHA处理组。说明,一定浓度范围内,JHA对上颚腺中fas的活跃程度有显著影响。