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目的:
运用声辐射力脉冲成像(Acoustic radiation force impulse,ARFI)技术定量评价兔肝门脉主干及肝固有动脉同时阻断前后及再开放后肝的弹性改变。
方法:
选择12只日本大耳白兔作为研究对象,经耳缘静脉麻醉后开腹,游离肝十二指肠韧带,用无损伤血管央完全夹闭肝十二指肠韧带,以阻断肝门脉及肝固有动脉,30min后松开血管夹,完全开放肝门脉及肝固有动脉,以建立兔肝缺血再灌注模型。采用Acuson S2000型彩色多普勒超声诊断仪,内置ARFI技术,4Cl探头,频率为2.0~4.0MHz。激活ARFI功能,分别于肝缺血前(T0)及缺血后5 min(T1)、20 min(T2)、30 min(T3)、再灌注后60min(T4)、120min(T5)对兔右肝同一部位进行检查,测量肝缺血再灌注过程中肝组织的弹性。在相应时间点经颈外静脉采血约2ml静置,待血液凝固后3500 r/min离心10min,取血清,经血清自动生化仪采用连续检测法检测血清门冬氨酸氨基转移酶(Aspartateaminotransferase,AST)、丙氨酸氨基转移酶(Alanine aminotransferase,ALT)水平。同时用16G穿刺活检针取肝组织,每个时间点于右肝观察区随机取肝组织3份,固定、常规石蜡包埋、切片,HE染色。所有数据采用SPSS15.0统计软件进行处理分析。计量资料以x±s表示,不同时间点检测指标两两比较采用SNK-q检验。P<0.05为差异有统计学意义。
结果:
T2兔右肝ARFI测值Vs(组织剪切波速度,单位:m/s)明显高于T0,差异有统计学意义(P<0.05),T3兔右肝ARFI测值Vs均明显高于T2,差异有统计学意义(P<0.05),T4兔右肝ARFI测值Vs稍高于T0,T5兔右肝ARFI测值Vs稍低于T0,但差异均无统计学意义(P>0.05);T2血清AST、ALT水平稍高于T0,但差异无统计学意义(P>0.05),T3血清AST、ALT水平明显高于T2,差异有统计学意义(P<0.05),T4、T5血清AST、ALT水平均明显高于T3,差异有统计学意义(P<0.05),T5血清AST、ALT水平明显高于T4,差异有统计学意义(P<0.05);通过组织学观察,T2肝板变细,肝窦变宽,炎症细胞浸润;T3肝窦塌陷,肝细胞聚集,可见炎症细胞浸润,T4、T5仅部分肝细胞出现水肿,肝窦及肝板组织形态恢复至基础状态。
结论:
1.肝缺血20min时肝实质ARFI测值Vs明显较基础状态下要高,与此时肝组织因缺血已经出现组织质地变硬的微观形态学改变相一致。而此时血清AST、ALT水平与基础状态相比无明显改变。
2.肝缺血30min完全再灌注后,肝组织的弹性状态与组织微观形态均可以恢复至基础状态。而此时血清AST、ALT水平持续升高,可能与肝血流灌注恢复有关。
3.组织弹性的改变与组织微观形态学的改变是相一致的,两者均要早于血生化指标的变化。
4.声辐射力脉冲成像技术能够定量分析缺血肝组织弹性改变,其测值Vs可以较早期、准确、客观地反映肝缺血再灌注过程中组织质地变化。