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目的：通过分离人脐带间充质干细胞(umbilical cord mesenchymal stem cells，UCMSCs)，采用系列细胞因子联合诱导，探索高效可靠的体外诱导分化为肝样细胞的技术方法。方法：采用健康产妇脐带，用酶消化法分离、培养脐带间充质干细胞（UCMSC）；流式细胞仪检测细胞抗原CD13、CD44、CD105、CD34、CD45、HLA-DR表达情况，鉴定分离的细胞是否为UCMSCs；用肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor，HGF)、成纤维细胞生长因子-4(Fibroblast growth factor-4FGF-4)及白细胞介素6（Interleukin-6IL-6）进行组合分组：A组：仅基础培养基，即为阴性对照组；B组：基础培养基+HGF+FGF-4；C组：基础培养基+HGF+IL-6；D组：基础培养基+HGF+FGF-4+IL-6诱导培养第3代（P3）的脐带MSCs，用免疫细胞化学法检测细胞标志物AFP、ALB的表达情况，比较各个诱导组诱导成肝样细胞的细胞比例。数据用均数±标准差（x±s）表示，采用SPSS18.0统计分析软件包进行分析，用单因素方差分析对资料进行统计分析。结果：1.UCMSC的细胞形态接种的UCMSC多于48小时后贴壁，5天后有短梭形细胞长出，后渐由短梭形变为细长扁平的长梭形，15天后出现梭形细胞集落，呈漩涡状或长条形生长，1月后细胞相互接触,并铺满整个培养皿底部。2.UCMSC鉴定取培养至第三代（P3）的脐带间充质干细胞行流式细胞仪检测细胞表面抗原表达，反映间充质干细胞的表面抗原CD13、CD44、CD105表达阳性，表达率分别为99.0%、98.4%、98.4%，而造血干细胞标志物CD34、CD45、HLA-DR表达阴性，表达率分别为4.6%、9.48%、5.04%。3.UCMSC的诱导分化3.1诱导成肝样细胞的细胞形态取培养至第三代的UCMSCs加入各细胞因子组合向肝样细胞诱导，经3~4周呈放射状的细胞排列结构逐步消失，长梭形细胞变类圆形或多角形，存在离散现象，胞浆出现颗粒，部分出现双核。3.2肝样细胞标志物表达对诱导出的肝样细胞行其标志物甲胎蛋白(AFP)及白蛋白（ALB）检测显示：A组始终没有见到肝样细胞的标志物白蛋白(ALB)、甲胎蛋白(AFP)的表达。而B、C、D组可以检测到肝细胞的标志物AFP、ALB的表达，AFP在诱导7天时，不同诱导组（B、C、D）比较，D组表达率最高；至15天时各组表达均减少，但D组仍最高；至诱导20天时各组表达均消失。而ALB在诱导7天、15天、20天都有强表达。在诱导第7天，B组表达率最高；诱导15天、20天， B、D组表达率高于C组。结论：1.使用酶消化法可以从人脐带中成功分离、培养出UCMSC。2.应用肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor，HGF)、成纤维细胞生长因子-4(Fibroblast growth factor-4FGF-4)及白细胞介素6（Interleukin-6IL-6）联合诱导UCMSCs可高效、稳定培养出肝样细胞。