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背景:应激作为人类多种重大致死性疾病的重要病因和诱因已经确认,应激对机体损伤作用机制和防治措施的研究引起了广泛关注。军事应激在性质、强度上有别于非军事应激,尤其是在现代战争条件下。军事应激危害的主要特点,一是“显性的”,直接导致非战斗减员和战斗减员。二是“隐性的”,大量存在但易被忽视,严重影响参战人员在战时战术水平的正常发挥。因此为了提高我军的战斗力,深入研究药物对军事应激损伤防护具有很现实的意义。本研究通过制造大鼠模拟渡海作训作为军事应激模型,用大鼠模拟渡海作训过程,将心理应激、高强度运动结合起来,运用生化检测仪分析血糖、血脂,放射免疫方法检测CORT、Tes、LH、GnRH、β-EP、IL-1β、IL-2及IL-6水平,比较不同药物对大鼠运动能力的影响,并观察垂体、肾上腺和睾丸超微结构的变化,联系神经-内分泌-免疫网络系统的整体作用,来揭示复合应激发生的可能机制及中药调节的深层机理。
方法:
1、雄性SD大鼠,体重120-150g,随机分为模拟渡海作训组(n=13)、五味子组(n=10)、复方五味子组(即称复方中药组)(n=14)和植物甾醇组(n=13)。模拟渡海作训组、五味子组、复方中药组和植物甾醇组均参照Bedford[1]的训练模式进行为期10天的训练,第11天时4组进行3小时的水上漂浮后,立即进行一次力竭性运动,记录各组力竭时间。
2、雄性SD大鼠,体重120-150g,随机分为安静对照组(n=10)、模拟渡海作训组(n=12)、五味子组(n=12)、复方中药组(n=9)和甲强龙组(n=12)。应激对照组、五味子组、复方中药组和甲强龙组参照Bedford[1]的训练模式进行为期10 d的训练,第11 d进行3 h的水上漂浮及3 h的跑台高强度运动,实验结束后运用生化检测仪分析Glu、TG、CHOL,放射免疫方法检测CORT、T、LH、GnRH、β-EP、IL-1β、IL-2及IL-6水平,取垂体、肾上腺及睾丸进行HE染色、电子显微镜检查以及垂体ACTH、NPY阳性细胞免疫组化检查,以便观察有无病理形态学、细胞超微结构和分泌功能改变。
结果:
1、力竭时间比较与安静组相比,五味子及复方中药均能显著提高运动至力竭的时间,而植物甾醇组无统计学意义。
2、Glu,TG,CHOL水平比较与A组相比,B组、E组Glu水平显著增高,TG、CHOL水平显著降低;与B组相比,C组的Glu水平降低,TG、CHOL水平升高,D组的Glu水平降低,TG水平升高,CHOL无统计学意义,E组TG水平升高,CHOL无统计学意义。
3、CORT、Tes、LH水平比较与A组相比,B组T浓度显著降低,CORT水平有升高的趋势但未达到统计学意义;与B组相比,C组CORT浓度显著降低,但仅能部分提高T的水平,D、E组只部分降低CIRT水平,部分提高T的水平;LH在4组中均无显著变化。
4、GnRH、β-EP水平比较与A组相比,B组GnRH、β-EP水平均显著升高;与B组相比,C组GnRH、β-EP水平显著降低,D组GnRH水平显著降低,但仅能部分降低β-EP水平,E组均无统计学意义。
5、IL-1、IL-2、IL-6水平比较与A组相比,B组IL-1、IL-2水平有升高的趋势,IL-6水平有降低的趋势;与B组相比,C组IL-1、IL-2水平显著降低,IL-6水平变化不显著,D组IL-1、IL-2、IL-6水平均显著降低,E组均无统计学意义。
6、垂体ACTH、NPY细胞免疫组化结果复合应激大鼠垂体ACTH、NPY阳性细胞表达减弱,复方中药组、五味子组大鼠垂体ACTH阳性细胞表达有增强趋势,但对垂体NPY阳性细胞表达影响弱。
7、垂体、肾上腺和睾丸的电镜结果电子显微镜观察发现,应激组大鼠与安静组相比垂体细胞胞浆中分泌颗粒显著减少,肾上腺细胞内脂滴减少并出现细胞凋亡,睾丸Leydig细胞线粒体肿胀,电子密度增加,嵴减少或消失,而五味子和复方中药对应激大鼠细胞超微结构均有一定的改善作用,使之更趋向于安静组大鼠细胞的结构。
结论:
1、运动应激和心理应激可使T显著降低,CORT有升高的趋势,造成复合应激模型。五味子可降低CORT升高的趋势,但对T的作用微弱,而复方中药对CORT、T的作用均较弱。
2、复合应激可使Glu、β-EP、GnRH升高,TG、CHOL降低,五味子组各指标均有改善趋势,而复方中药组对β-EP、GnRH、CHOL作用较弱。
3、复合应激对IL-1、IL-2有较弱的升高趋势而对IL-6有降低的趋势,复方中药能降低IL-1、IL-2和IL-6。五味子只降低IL-1和IL-2而对IL-6无明显作用。
4、复合应激大鼠垂体ACTH、NPY阳性细胞表达减弱,复方中药组、五味子组大鼠垂体ACTH阳性细胞表达有增强趋势,但对垂体NPY阳性细胞表达影响弱。
5、五味子和复方中药均能显著提高大鼠运动到力竭的时间。
6、电子显微镜观察发现,应激组大鼠与安静组相比垂体细胞胞浆中分泌颗粒显著减少,肾上腺细胞内脂滴减少并出现细胞凋亡,睾丸Leydig细胞线粒体肿胀,电子密度增加,嵴减少或消失,而五味子和复方中药对应激大鼠细胞超微结构均有一定的改善作用,使之更趋向于安静组大鼠细胞的结构。
综上实验结果表明:
1、五味子和复方中药均有显著的抗疲劳的作用,但复方中药的作用强于五味子。
2、五味子和复方中药能改善应激大鼠代谢紊乱的状况。
3、五味子和复方中药可从不同方面调节心理应激和运动应激所造成神经-内分泌-免疫系统的紊乱,增强大鼠的抗应激能力。