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目的:本课题以雌性C57BL/6小鼠为对象,应用髓鞘少突胶质细胞糖蛋白35-55多肽(myelin oligodendrocyte glycoprotein peptides,MOG35-55)对实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE)模型进行制备,运用补阳还五汤(Buyang Huanwu decoction,BYHWD)灌胃进行干预,观察对照组和治疗组的临床症状、病理变化及BYHWD对小鼠中枢神经系统(central nervous system,CNS)脊髓、外周免疫系统脾脏单核巨噬细胞的影响。探讨BYHWD治疗EAE的有效性及对单核巨噬细胞免疫调控的作用及机制。方法:雌性C57BL/6小鼠42只,用小鼠MOG35-55多肽免疫制备成EAE的模型,按照随机数字分配表将小鼠分为EAE对照组、BYHWD治疗组,每个组各有21只动物。在免疫后的第3天开始进行灌胃给药,EAE对照组予以自来水、BYHWD治疗组给予BYHWD,500μl/只/d(含原药1g),持续观察临床症状和体重变化。免疫后17天(p.i.17)各组统一处死9只动物,无菌分离脾脏,5只用于制备脾脏单个核细胞混悬液,流式细胞术(Flow CytoMetry,FCM)检测脾脏单核巨噬细胞M1型和M2型细胞亚型;4只脾脏经脱水后制成冰冻切片进行免疫荧光组织化学染色,检测iNOS、Arginase-1的表达。脊髓冰冻切片进行HE染色观察炎性细胞浸润情况,罗氏染色观察脊髓髓鞘脱失比例,免疫荧光组织化学染色、Western blot法检测脊髓巨噬细胞iNOS、TNF-α、Arginase-1及IL-10的表达。运用统计分析软件Graphpad Prism 6.0对实验结果进行分析处理。结果:1.C57BL/6小鼠由MOG35-55抗原乳剂免疫诱导后EAE小鼠模型成功建立。从平均起病时间来看,BYHWD组较EAE对照组而言,起病时间明显推迟,临床症状评分明显降低;同时,BYHWD治疗组可明显抑制EAE小鼠在发病期间的体重减轻(p<0.01)。2.BYHWD治疗后可减轻EAE小鼠脊髓的髓鞘脱失程度(p<0.05)。3.HE染色和免疫荧光组织化学染色观察到EAE脊髓有不同程度的炎性细胞浸润。BYHWD可以减轻CNS CD68+单核巨噬细胞及炎性细胞的浸润(p<0.05)。4.EAE小鼠经BYHWD治疗后,可显著抑制脊髓及脾组织中巨噬细胞iNOS、TNF-α、CD16/32的表达,同时促进Arg-1、IL-10、CD206的表达(p<0.05)。结论:1.BYHWD对EAE具有较好的治疗效果,可以延缓EAE的发病程度,减轻EAE小鼠精神萎靡、食欲不振、四肢痿弱甚至瘫痪等中医“痿症”的临床症状。2.BYHWD可减轻EAE髓鞘脱失,抑制炎性细胞浸润,促进髓鞘再生。3.BYHWD促进EAE脊髓及脾组织中M1型巨噬细胞转化为M2型。其疗效机制可能与其抗炎、诱导巨噬细胞极性转化相关。