论文部分内容阅读
本试验采用近年来被公认的最有效的外源蛋白表达系统之一毕赤酵母表达系统，构建了猪源抗菌肽CecropinP1的酵母表达载体。主要试验工作如下：
首先研究了从猪小肠粘膜细胞中提取总RNA。通过反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)扩增cDNA基因，将获得的片段与载体pMD18-T质粒连接，转化至大肠杆菌E.coliJM109，对平板上的白色菌落用M13-47/RV-M引物进行PCR，用琼脂糖凝胶电泳检测所含质粒中插入片段的长度。并对阳性质粒DNA用核苷酸序列分析仪测序并分析。
结果表明：克隆的CAG334基因全长118bp，CecropinP1的基因已成功地转化到酵母菌GS115中。经甲醇诱导培养的酵母菌中发现其表达。