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目的:研究胃肠安方及乌索酸对人结肠癌HT-29细胞增殖的影响,并且通过VEGF-R以及Leptin/STAT3信号通路了解胃肠安方及乌索酸拮抗对瘦素促HT-29人结肠癌细胞增殖的作用和机制研究。方法:1.建立人结肠癌HT-29细胞体外培养模型分别筛选胃肠安方、乌索酸以及瘦素用药浓度。设置空白对照组,然后采用不同梯度浓度的胃肠安方(0.5、1.0、1.5、2.0、2.5mg/ml)、乌索酸(8、16、24、32μmol/L)以及瘦素(50、100、150、200ng/ml)分组作用于人结肠癌细胞HT-29,药物作用48小时后用CCK8法检测各组的OD值,以对照组为标准并计算出细胞相对存活率。2.体外培养人结肠癌细胞HT-29,建立空白对照组、模型组、Leptin+AG490组、Leptin+胃肠安组、Leptin+胃肠安+AG490组、Leptin+乌索酸组、Leptin+乌索酸+AG490组。空白对照组用完全培养基培养,模型组在对照组的基础上加入浓度为150ng/ml的瘦素(Leptin),Leptin+AG490组在模型组的基础上加入浓度为0.1μmol/L的stat3抑制剂AG490,Leptin+胃肠安组在模型组的基础上加入浓度为1.75mg/ml的胃肠安,Leptin+胃肠安+AG490组在模型组的基础上加入浓度为0.1μmol/L的Stat3抑制剂AG490和浓度为1.75mg/ml的胃肠安。Leptin+乌索酸组在模型组的基础上加入浓度为27μmol/L的乌索酸,Leptin+乌索酸+AG490组在模型组的基础上加入浓度为0.1μmol/L的Stat3抑制剂AG490和浓度为24μmol/L的乌索酸。共育24小时后用Western-Blot法检测细胞中与Jak/stat3信号通路有关蛋白的含量;RT-PCR法检测细胞中与Jak/stat3信号通路有关基因的表达量;Elisa试剂盒检测细胞血管生成因子(VEGF)的表达量。结果:1.加入不同浓度的胃肠安、乌索酸组细胞相对存活率低于对照组(P<0.05),并随着药物浓度增加而降低,加入不同浓度瘦素组细胞存相对活率均高于对照组。2.模型组细胞相对存活率明显高于对照组(P<0.05),Leptin+AG490组、Leptin+胃肠安组、Leptin+胃肠安+AG490组、Leptin+乌索酸组、Leptin+乌索酸+AG490组相对存活率低于模型组(P<0.05),Leptin+胃肠安组+AG490组相对存活率略低于Leptin+胃肠安组(P<0.05),Leptin+乌索酸组相对存活率略低于Leptin+乌索酸+AG490组(P<0.05)。3.模型组细胞分泌VEGF含量大于对照组(P<0.05),Leptin+AG490组、Leptin+胃肠安组、Leptin+胃肠安+AG490组、Leptin+乌索酸组、Leptin+乌索酸+AG490组细胞分泌VEGF含量低于模型组(P<0.05),Leptin+胃肠安组+AG490组VEGF含量略低于Leptin+胃肠安组,Leptin+乌索酸组VEGF含量略低于Leptin+乌索酸+AG490组(P<0.05)。4.模型组细胞中P-stat3、Stat3、survivin、VEGF-R、lepein-R蛋白含量高于对照组(P<0.05),Leptin+AG490组、Leptin+胃肠安组、Leptin+胃肠安+AG490组、Leptin+乌索酸组、Leptin+乌索酸+AG490组中P-stat3、Stat3、survivin、VEGF-R、lepein-R蛋白含量低于模型组(P<0.05),Leptin+胃肠安组+AG490组P-stat3、Stat3、survivin、VEGF-R、lepein-R蛋白含量略低于Leptin+胃肠安组,Leptin+乌索酸组P-stat3、Stat3、survivin、VEGF-R、lepein-R蛋白含量略低于Leptin+乌索酸+AG490组(P<0.05)。5.模型组细胞中基因survivin、VEGF、C-myc含量高于对照组(P<0.05),Leptin+AG490组、Leptin+胃肠安组、Leptin+胃肠安+AG490组、Leptin+乌索酸组、Leptin+乌索酸+AG490组细胞中基因survivin、VEGF、C-myc含量低于模型组(P<0.05),Leptin+胃肠安组+AG490组中survivin、VEGF、C-myc含量低于Leptin+胃肠安组(P<0.05),Leptin+乌索酸组中survivin、VEGF、C-myc含量低于Leptin+乌索酸+AG490组(P<0.05)。结论:瘦素可以促进人结肠癌细胞HT-29增殖;胃肠安方以及瘦素可以拮抗瘦素诱导人结肠癌细胞HT-29增殖的作用;胃肠安方以及乌索酸可以下调瘦素干预后人结肠癌细胞HT-29中的P-stat3、Stat3、Leptin-R、Survivin、VEGF-R-1蛋白的表达以及VEGFm RNA、C-mycm RNA、Survivinm RNA的表达以及细胞血管生成因子(VEGF)分泌。其作用机制可能与通过作用Leptin/STAT3信号通路及VEGF途径有关。