禽流感（AI）是由禽流感病毒（AIV）引起的禽类传染性疾病。疫苗接种是预防AI最有效的方法之一。DNA疫苗是新一代疫苗,但裸质粒DNA在递送过程中易被降解,导致其生物利用度降低等,限制了DNA疫苗广泛应用。目前,可降解生物纳米材料作为质粒DNA递送载体受到了广泛关注。用纳米材料作为基因递送载体可弥补DNA疫苗存在的弊端,具有保护DNA免受降解、提高转染率、增强免疫效果等优势。本试验将二氧化硅（SiO₂）与镁铝双层氢氧化物（LDH）用共沉淀合成LDH@SiO₂壳-核生物纳米复合材料,以表达H9N2亚型AIV的HA蛋白的质粒pβH9N1SH5为模型抗原,制备载质粒pβH9N1SH5 LDH@SiO₂纳米疫苗（pβH9N1SH5/LDH@SiO₂ NPs）,并对其各理化指标、体外毒性、体外表达、体外释放以及免疫效果等进行评价。试验结果表明:1)制备的LDH形态规则,成片状结构,分散性好,平均粒径为（925.60±21.91）nm,分散系数为0.354,Zeta电位为（45.30±0.63）mV;2)成功合成了LDH@SiO₂壳-核生物纳米复合材料,LDH@SiO₂外观完整,平均粒径为（357.31±2.03）nm,分散系数为0.005,Zeta电位为（29.81±1.06）mV;3)制备的pβH9N1SH5/LDH@SiO₂ NPs形态规则、外形完整,包封率（85.21±0.89）%（n=3）,载药量（47.32±1.45）%（n=3）;4)体外释放试验结果表明,质粒pβH9N1SH5从pβH9N1SH5/LDH@SiO₂ NPs中的释放过程是先突释后缓慢平稳释放;5)体外抗核酸酶降解试验结果表明,LDH@SiO₂能够保护质粒pβH9N1SH5免受核酸酶降解;6)体外表达试验结果表明,pβH9N1SH5/LDH@SiO₂ NPs能够转染进入293T细胞并表达目的蛋白;7)细胞毒性试验结果表明,pβH9N1SH5/LDH@SiO₂ NPs毒性较低,安全性高,可以作为质粒pβH9N1SH5递送载体;8)小鼠免疫试验结果表明,pβH9N1SH5/LDH@SiO₂ NPs肌肉注射刺激小鼠产生了高水平IgG抗体,抗体水平明显高于其他组（p<0.05）,且抗体维持时间长;pβH9N1SH5/LDH@SiO₂ NPs免疫组IFN-γ、IL-2分泌水平高于其他组（p<0.05）;pβH9N1SH5/LDH@SiO₂ NPs刺激指数明显高于其他组。本试验结合SiO₂具有搭载大分子的能力和LDH层状结构的优势,成功合成了LDH@SiO₂复合材料,其安全性高可以作为pβH9N1SH5递送载体,制备禽流感纳米DNA疫苗,实现了保护质粒DNA免受降解、缓慢释放药性及提高裸DNA疫苗免疫效果的目的,为禽流感H9N2纳米DNA疫苗领域提供了理论依据,具有一定的应用前景。