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在成人及儿童中，恶性脑胶质瘤是一类最恶性的肿瘤，是致残及致死的主要原因；发病率约为2—3／10万。尽管诊断及治疗的进步(手术，辅助放疗，化疗)，但仍只有10％多形性胶母细胞瘤患者，40％间变性星形细胞瘤患者能够生存2年以上，因此本病的预后仍然不佳。探索更新更有效的恶性脑胶质瘤治疗方法是十分必要的。 当今将目的基因转移至体细胞被认为是治疗人类许多难治性疾病的崭新方法。药敏基因疗法(或自杀基因疗法)是基因治疗方法中的一种，以单纯疱疹病毒胸苷激酶基因(HSV-tk基因)做为目的基因在药敏基因疗法中应用最广。95年底统计近120项临床肿瘤基因治疗／标记方案中，21项采用药敏基因疗法，其中有12项针对恶性脑胶质瘤。单纯疱疹病毒胸苷激酶(HSV-TK酶)能够将核苷类似物Ganciclovir(GCV，环丙鸟苷)，一种对正常哺乳动物细胞无毒性的抗病毒药物，三磷酸化后成为GCVTP(这一过程需要有细胞TK酶的协助)。GCVTP成为DNA链延伸的终止物阻断了DNA的复制合成，最终导致含有HSV-tk基因的细胞被杀灭。在转导细胞(HSV-tk~+)被杀灭同时，邻近非转导细胞(HSV-tk~-)也被杀灭，这一现象被称为“旁观者效应”，此为HSV-tk-GCV系统杀灭肿瘤细胞的另一重要机理。鉴于恶性脑胶质瘤是在正常脑细胞这一非分裂细胞环境中生长，而反转录病毒的前病毒能整合到分裂细胞的基因组中，因此反转录病毒载体将目的基因转移至恶性脑胶质瘤是很特异的。反转录病毒携带HSV-tk基因并将其转移至脑肿瘤细胞然后给予GCV治疗是治疗脑肿瘤的新方法；体内，体外实验均获得成功，初步临床报道表明该方法治疗脑肿瘤效果令人鼓舞。看来反转录病毒载体介导的HSV-tk-GCV系统(Rv Vector-HSV-tk-GCV系统)对恶性脑胶质瘤的治疗是很适合的。 本实验组利用NTK(含HSV-tk基因)反转录病毒载体，以磷酸钙共沉淀法转染包装细胞PA317细胞系，分离并扩增抗G418克隆，Southern-blot杂交证实前病毒的整合；测定上清病毒滴度；建立了能产生反转录病毒载体的双向性包装细胞系(VPC细胞)PA317／NTK。体外利用VPC的上清感染C6大鼠脑胶质瘤细胞，经G418筛选出C6／NTK11并扩增之。Southern-blot杂交及