【摘 要】
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目的:探讨内质网应激介导CREB3L1诱导胶质瘤细胞凋亡的潜在作用机制。方法:收集贵州医科大学附属医院神经外科2018年1月至2019年1月期间行手术切除的不同病理学级别的脑胶质瘤标本蜡块30例,采用免疫组化的方法检测CREB3L1及内质网应激等相关蛋白在不同恶性程度的胶质瘤组织上的表达情况。体外常规培养U251和U87-MG胶质瘤细胞,通过不同药物浓度的内质网应激源毒胡萝卜素处理细胞,终浓度为0
【基金项目】
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国家自然科学基金（81560409）,题目:表皮生长因受体拮抗剂在恶性脑胶质瘤细胞的抑制作用研究； 贵州省科技厅项目（gzwkj[2022-090]）,题目:基于转录组测序下FAK/CREB3互作介导内质网应激对胶质瘤细胞凋亡的分子机制研究；
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目的:探讨内质网应激介导CREB3L1诱导胶质瘤细胞凋亡的潜在作用机制。方法:收集贵州医科大学附属医院神经外科2018年1月至2019年1月期间行手术切除的不同病理学级别的脑胶质瘤标本蜡块30例,采用免疫组化的方法检测CREB3L1及内质网应激等相关蛋白在不同恶性程度的胶质瘤组织上的表达情况。体外常规培养U251和U87-MG胶质瘤细胞,通过不同药物浓度的内质网应激源毒胡萝卜素处理细胞,终浓度为0μmol/L、0.025μmol/L、0.05μmol/L和0.1μmol/L。然后应用CCK-8法检测不同时间及不同药物浓度处理后的细胞增殖活性的改变;以AnnexinⅤ-FITC/PI双染色法检测细胞的凋亡情况,Western blot方法在蛋白水平上检测CREB3L1与内质网应激等蛋白的表达情况。结果:免疫组化结果显示CREB3L1、GRP78、CHOP在世界卫生组织（WHO）Ⅰ级胶质瘤中的表达水平高于WHOⅡ、Ⅲ、Ⅳ级胶质瘤组织（均P＜0.01）。CCK-8结果显示:毒胡萝卜素处理胶质瘤细胞U251、U87-MG后,细胞活性明显下降（均P＜0.05）,且具有时间和药物浓度依赖性;流式细胞术结果显示:细胞凋亡率升高,在药物浓度0.1μmol/L时凋亡率明显（P＜0.01）。毒胡萝卜素处理后的胶质瘤细胞,CREB3L1、GRP78、CHOP蛋白表达增强（P＜0.05）;Bcl-2表达水平下降（P＜0.05）。结论:CREB3L1及内质网应激相关蛋白表达水平与肿瘤的恶性程度有关。内质网应激可能通过介导CREB3L1的表达降低细胞活性,提高细胞凋亡水平。CREB3L1可能作为治疗胶质瘤的一个新的潜在靶点。
其他文献
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