【摘 要】
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目的:运用3D打印技术精确制备大体三维框架、联合静电纺丝技术制备细胞生长的超细纤维支架,一体化制备出的骨组织工程复合物为骨重建修复提供一种新的方案。方法:以聚己内酯（polycaprolactone,PCL）为原材料,3D打印精确构建三维框架,同时将聚乙烯醇（polyvinyl alcohol,PVA）+Ⅰ型胶原（collagen type Ⅰ,Col Ⅰ）携带人脐静脉内皮细胞（human umb
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目的:运用3D打印技术精确制备大体三维框架、联合静电纺丝技术制备细胞生长的超细纤维支架,一体化制备出的骨组织工程复合物为骨重建修复提供一种新的方案。方法:以聚己内酯（polycaprolactone,PCL）为原材料,3D打印精确构建三维框架,同时将聚乙烯醇（polyvinyl alcohol,PVA）+Ⅰ型胶原（collagen type Ⅰ,Col Ⅰ）携带人脐静脉内皮细胞（human umbilical vein endothelial cells,HUVECs）和小鼠胚胎成骨细胞前体细胞（MC3T3-E1）作为壳层,聚乙烯吡咯烷酮（polyvinyl pyrrolidone,PVP）作为芯层材料进行同轴电纺,将同轴静电纺丝所得的细胞-支架复合物置于3D打印所构建的框架材料内,同时注入含MC3T3-E1细胞的海藻酸水凝胶填充入整个三维框架内,以上作为实验组;使用PVA+Col Ⅰ作为壳层,PVP作为芯层进行同轴电纺,接收装置为滚筒,将HUVECs和MC3T3-E1细胞滴加到制得的薄膜上,再与3D打印支架结合,此为对照组。透射电镜（transmission electron microscope,TEM）观察静电纺丝的同轴结构,Live/Dead染色评估支架的细胞相容性,CD31免疫荧光染色评估体外成血管能力,茜素红染色、碱性磷酸酶染色评估体外成骨能力,Micro CT、HE染色及Masson染色评估体内成骨能力。结果:透射电镜下可见3D打印框架内的静电纺丝呈芯/壳结构,Live/Dead染色实验和扫描电镜证明HUVECs和MC3T3-E1在静电纺丝纤维中的分布更加均匀。CD31免疫荧光检测表明,载细胞同轴电纺的支架比传统在已构建支架上直接滴加细胞得到的支架成血管情况更好,体外培养的茜素红和碱性磷酸酶染色展现了MC3T3-E1细胞良好的增殖及成骨分化。Alamar blue实验结果表明实验组细胞增殖较对照组明显。复合支架植入SD大鼠颅骨缺损处4、8周后,Micro CT结果显示在4周、8周时,实验组的新生骨量高于对照组,HE染色及Masson染色均证明前者效果优于后者。结论:结果表明,静电纺丝联合3D打印技术构建组织工程骨可有效解决骨缺损修复的问题,同时相比传统的支架构建技术可提高新生骨组织的血管化的可能。
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目的:FBXW7（F-box and WD repeat domain-containing protein 7）是泛素-蛋白酶体系统的成员,其可以特异性识别并结合底物蛋白,在蛋白质翻译后泛素化修饰过程中发挥重要的调节作用。前期研究发现,FBXW7在临床肝癌组织中的表达低于癌旁非肿瘤组织,并负向调控肿瘤细胞的侵袭及迁移能力。然而,FBXW7在肝癌干细胞中的表达情况,对肝癌干细胞样生物学特性的影响及
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