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目的:根据五行学说及藏象学说,从脾土、肺金及肝木的五行生克原理及脏腑整体观角度出发,观察用健脾益气、健脾养肺、疏肝健脾养肺三个不同治法(方剂分别为加味异功散、黄味异功散及柴味异功散)治疗肺脾两虚证模型大鼠的疗效。探讨不同治法对肺脾两虚证大鼠的免疫功能、脑内神经递质的影响及其作用机制,通过实验说明抑木扶土生金法疗效较优,为小儿肺脾两虚证的临床治疗提供新思路及依据。方法:选择SPF级,3-4周龄,雄性Wistar幼年大鼠46只,体重105g左右。将大鼠随机分为2组:正常组(10只),造模组(36只)。(1)三天适应饲养后,除了正常组外,造模组采用烟熏、木瓜蛋白酶雾化及利血平0.2mg/kg肌肉注射,造模30天。第31天分别从正常组和造模组随机各取大鼠2只,取肺、胃、小肠组织观察病理变化。(2)造模成功后,进行治疗干预,造模组再随机分为4组,分别为模型组、健脾益气组(简称加味组)、健脾养肺组(简称黄味组)、疏肝健脾益气组(简称柴味组),每组8只,正常组、模型组每日一次灌服生理盐水,加味组予加味异功散灌胃,黄味组予黄味异功散灌胃,柴味组予柴味异功散灌胃,容积按1ml/100g换算计量,持续18天。观察实验大鼠的体重、皮毛、食量、大便情况、精神状态、活动情况等一般情况及存活情况。实验第7周末处死大鼠取材,腹主动脉取血,血液离心取上清液,剥取大鼠脑组织匀浆后离心取上清,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测外周血免疫球蛋白IgA、IgG、IgE水平,用酶联免疫吸附法(ELISA)检测大鼠脑内神经递质去甲肾上腺素(NE)及多巴胺(DA)水平;取肺、胃、小肠组织,HE染色,光学显微镜检测形态学变化。结果:(1)一般情况:正常组的大鼠体重增长明显,食欲佳,毛发光泽,大便正常,眼睛有神,精神状态好,活动自如。其余各组造模后10天后出现体重增长不明显,进食量及活动量减少,弓背蜷缩等,继之出现眯眼,咳嗽气促,毛发稀疏无泽,脱毛,竖毛,消瘦,进食量及活动量明显减少,大便质软偏稀,肛门秽浊,反应迟钝,精神萎靡倦怠。治疗期间,各治疗组治疗1周后大鼠反应逐渐好转,进食量及活动量较前增加,毛发、大便情况、精神状态较前均有改善,而模型组一般情况没有改善。(2)血清IgA、IgG检测结果:模型组大鼠IgA、IgG水平明显低于正常组(P<0.01);与模型组相比较,柴味组、黄味组、加味组大鼠IgA、IgG水平均显著升高(P<0.05或P<0.01),但三组大鼠相比无差异(P>0.05)。(3)血清IgE检测结果:与正常组相比,模型组大鼠IgE含量显著增加,有统计学意义(P<0.01);与模型组相比,柴味组、黄味组、加味组大鼠IgE含量均明显降低(P<0.05),但三组大鼠IgE水平无明显差异(P>0.05)。(4)脑内去甲肾上腺素及多巴胺检测结果:模型组大鼠脑内DA浓度显著低于正常组(P<0.01);与模型组相比,柴味组、黄味组、加味组大鼠的DA浓度均明显升高(P<0.05或P<0.01),且柴味组明显高于黄味组、加味组(P<0.05),但后两者相比无差异。模型组大鼠脑内NE浓度较正常组降低,但无显著性差异(P>0.05)。与模型组相比,三组大鼠NE浓度有升高趋势,但相比无差异(P>0.05)。(5)病理:模型大鼠支气管黏膜上皮细胞粘连、大量炎性细胞浸润、肺间质水肿、管壁充血扩张明显等;胃组织可见胃黏膜萎缩、粘液增多、炎性细胞浸润;小肠组织可见小肠绒毛脱落、上皮细胞萎缩、间质水肿等,经治疗后较之明显恢复,但各治疗组无明显差异。结论:(1)采用烟熏、木瓜蛋白酶雾化加利血平注射法能成功复制肺脾两虚证大鼠模型。(2)肺脾两虚模型大鼠涉及消化、免疫、神经等多方面紊乱,脑内单胺类递质转化代谢存在障碍。(3)柴味异功散、黄味异功散及加味异功散均能提高肺脾两虚证大鼠的体质量,改善症状及体征;均能增强肺脾两虚大鼠的免疫功能,升高血清IgA、IgG浓度,同时降低血清IgE浓度;均能改善肺脾两虚证大鼠肺、支气管、胃及小肠组织的病理学形态,减轻受损情况及炎症程度;均能使脑内的单胺类神经递质DA含量升高,改善神经紊乱状态。柴味异功散在提高肺脾两虚大鼠脑内DA方面效果优于黄味异功散和加味异功散。说明健脾益气法、健脾养肺法和疏肝健脾养肺法皆能增强肺脾两虚机体的免疫功能,在改善机体神经紊乱方面,疏肝健脾养肺法(抑木扶土生金法)优于培土生金法及健脾养肺法。