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苹果作为大众消费水果含有大量次生代谢物,a-法尼烯和类黄酮是苹果果皮中一类重要的次生代谢物质,与果实的品质、贮藏过程中的病害、昆虫诱导作用有关。本研究以青香蕉苹果为材料,研究了苹果中的重要次生代谢物质 a-法尼烯及类黄酮的分离提取和测定技术,并结合外源抗氧化剂,对不同处理果皮提取物及类黄酮提取物清除 DPPH·自由基的性能进行了探讨,主要结果如下: 1.初步建立了苹果中 a-法尼烯的提取分离的技术路线,为进一步研究 a-法尼烯及其生物学效应奠定了基础。 2.改进了 a-法尼烯的测定技术。用紫外光谱法和 HPLC 两种测定方法测定了果皮中的 a-法尼烯含量。HPLC 测定法比紫外光谱法的测定结果更精确。引起紫外光谱法测定值偏高的原因主要有:测定液中的其它物质在 232nm 处也有吸收峰,使 a-法尼烯的吸收峰比实际吸收峰高。其次,提取液在 210nm 处存在一强吸收峰,此峰可能会干扰并拔高 232nm 处的吸收峰而使紫外光谱法测定的结果比实际值偏高。同时测定比较了不同处理果皮的 a-法尼烯含量。 3.建立了苹果果皮总黄酮的提取技术并测定总黄酮含量。采用正交试验筛选了果皮总黄酮温浸法提取的最佳提取条件:水浴温度为 65℃, 1<WP=8>李 红 苹果果皮中 a-法尼烯和类黄酮的提取及其抗氧化能力研究乙醇浓度为 65%,提取时间为 2h,固液比为 1:20。此条件下测得总黄酮得率为 3.66%。同时测定比较了果皮阴面和阳面的总黄酮含量,果实阳面果皮的总黄酮含量比阴面果皮总黄酮含量高。 4.用 DPPH·法测定了总黄酮提取物、果皮水溶性提取物和脂溶性提取物以及其它不同处理果实的清除自由基能力。通过试验证明,苹果果皮提取物具有较强的清除 DPPH 自由基的能力,说明苹果提取物含有能清除羟基自由基、烷基自由基或者过氧自由基的抗氧化物质。果皮水溶性提取物的抗氧化能力比脂溶性提取物的抗氧化能力强;果皮阳面提取物的抗氧化能力比阴面果皮提取物抗氧化能力强。 5.外源抗氧化剂清除 DPPH·能力的研究表明,芦丁和槲皮素对DPPH·均有较强的清除能力,在一定浓度范围内,清除 DPPH·的能力随抗氧化剂物质量的增加而增加,槲皮素具有较强的清除 DPPH·自由基的能力。DPA 是一种传统用于虎皮病防治的抗氧化剂,也具有清除DPPH·的能力。