长江饮用水源水对小鼠CYP7A1基因致突变性研究

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检测长江南京饮用水源水中的有机毒物,采用液液萃取及气质联用(GC-MS)方法。检测出20种PAHs总浓度达9.41μg/L,超出WHO标准浓度23.5倍,潜在有机毒物的化学致癌风险。  检测研究长江南京饮用水源水潜在诱发癌症风险的基因组表达毒性,采用基因芯片技术。发现转录表达异常的基因585个。涉及结肠直肠癌、乳腺癌、骨髓癌、白血病、胃癌、胰腺癌、生殖系统癌、肝癌等,潜在基因组毒性致癌风险。  研究长江南京饮用水源水对小鼠目标基因的单核甘酸多态性(SNPs)毒性,应用DNA测序法。检索NCBI的GenBank数据库,获得目标基因CYP7A1的核苷酸序列;检索MGI的SNPs数据库,获得CYP7A1目标基因655bp片断中的SNPs位点;运用Primer5.0信息软件设计扩增CYP7A1基因655bp片断的引物。  应用UNIQ柱式试剂盒提取小鼠(Mus musculus,ICR)肝脏DNA为PCR扩增反应的模板,PCR反应获得CYP7A1基因655bp片断的扩增产物;对纯化后655bp片断的PCR产物进行测序。结果发现,长江南京饮用水源水诱发小鼠CYP7A1基因中12个单核苷酸发生突变,突变率为0.832%;但是对小鼠655bp片段中的4个标准的SNPs位点,不存在中毒现象。  检测研究长江南京饮用水源水对小鼠基因组的遗传毒性,采用DNA多态性随机扩增(RAPD)方法。合成随机扩增的40条引物,分别扩增长江饮用水源水、BaP化学溶液、清洁水受试小鼠的基因组DNA,共获得1198条电泳条带,平均每只小鼠每条引物扩增条带数为4.99。共检测到189个位点,其中多态性位点151个。运用遗传相似性指数、Shannon多样性指数、Neis遗传分化法、Neis遗传距离、AMOVA等方法分析表明,长江南京饮用水源水对小鼠的基因组存在遗传毒性,但是低于3.8μg/L苯并芘的化学品溶液。
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