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microRNA(miRNA)是一类19到24个核苷酸大小的非编码小RNA,在转录后水平和翻译水平,通过与靶基因mRNA的3’非编码区(UTR)结合,在转录后和翻译水平抑制靶基因的表达。已有的研究表明,抑癌基因启动子区的异常甲基化、miRNA的异常表达与白血病的发生发展密切相关。从调控的环节上,DNA的甲基化参与基因的转录前调控,而miRNA参与转录后和翻译水平的调节。miRNA与DNA甲基化同为表观遗传调控的重要方式,两者之间虽相对独立但并非彼此孤立,两者间有着密切联系,共同调控基因在时空上有序的表达。miRNA启动子区CpG岛的甲基化和去甲基化分别能抑制和激活相应的miRNA的表达。本研究通过对K562细胞系去甲基化处理,通过miRNA表达芯片筛选上调的miRNAs,结合生物信息学有选择的通过荧光实时定量PCR的方法验证芯片中上调的结果,发现去甲基化可使miR-663的表达上调。采用荧光实时定量PCR的方法,在正常人骨髓白细胞、慢性粒细胞白血病(CML)病人外周血白细胞、白血病细胞系检测miR-663的表达水平。用硫化测序的方法分析K562细胞系及正常人骨髓白细胞miR-663前体上游的CpG岛甲基化的状态。用双荧光报告系统分析miR-663前体上游的CpG岛的启动子活性。结合生物信息学预测miR-663所调控的潜在靶基因,从中选出侯选靶基因H-ras及SRC进行研究,将构建有潜在的靶基因3’UTR的重组荧光报告质粒,构建有表达miR-663前体的重组表达质粒及pRL-TK荧光报告质粒共转染HEK293T细胞,较对照组找出过表达miR-663后,能使荧光表达下调的靶基因；进一步做靶基因3′UTR结合位点的突变实验,与对照组相比,检测荧光是否恢复。在K562细胞过表达miR-663,与对照组相比,通过western检测其所调控的靶基因蛋白表达水平的变化。分别在K562细胞过表达miR-663、抑制miR-663的功能及通过RNA干扰(siRNA)的方法降低相应靶基因的表达,观察对K562细胞增殖、细胞凋亡及细胞周期的影响。采用荧光实时定量PCR的方法,在正常人及CML病人的骨髓白细胞中检测miR-663的表达水平及H-ras的表达水平。研究结果表明,K562细胞miR-663前体上游CpG岛区具有启动子活性,与正常人骨髓白细胞相比,存在异常甲基化,去甲基化可上调miR-663的表达,miR-663是潜在受CpG岛调控的miRNA。miR-663可以调控其靶基因H-ras的表达,过表达miR-663至少可部分通过促进K562细胞的凋亡从而抑制K562细胞的增殖。较正常人骨髓白细胞,miR-663在CML病人骨髓白细胞中低表达。