维生素K3协同三氧化二砷(As203)诱导雄激素非依赖性前列腺癌细胞株PC-3凋亡的研究

来源 :大连医科大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:wallopczp
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目的:三氧化二砷(As2O3)可以诱导雄激素非依赖性前列腺癌(HRPCa)细胞株PC-3细胞凋亡,但是高剂量As2O3的毒副作用制约了其临床使用剂量,这严重影响了三氧化二砷的临床疗效,而寻找一种可以增加As2O3诱导凋亡效应的辅助药物来打破As2O3临床应用剂量的瓶颈是一种新的思路。本课题通过研究维生素K3联合As2O3作用于PC-3细胞株生物学效应,探索维生素K3是否与As2O3有协同作用,为As2O3治疗HRPCa及众多实体瘤的临床应用奠定理论基础。方法:相差显微镜观察不同浓度的维生素K3和As2O3,单独或联合作用于体外培养的雄激素非依赖前列腺癌细胞PC-3细胞株,MTT法检测细胞的存活率,流式细胞仪(FCM)检测细胞的凋亡率,Annexin V、PI双染色法,荧光显微镜观察细胞凋亡,RT—PCR检测两种药物单独及联合作用后,HRPCa细胞株PC-3细胞中Survivin基因的表达情况。结果:MTT法检测结果显示:两种药物单用时,对细胞生长具有抑制作用,各组间具有统计学差异(P<0.05);两种药物联合使用时,与单独用药组相比,能明显增加HRPCa细胞株PC-3的生长抑制率,组间具有统计学差异(P<0.01);药物相互作用指数(CDI)均<1,说明两药具有协同作用。FCM检测结果显示:两种药物单用时,均可见细胞死亡,以凋亡为主;二者联合应用时,细胞的死亡率明显高于二者单独作用细胞组,并且其死亡率随着药物浓度的增加和作用时间的延长而提高,死亡细胞以凋亡为主。免疫荧光显微镜分析细胞死亡形态,正常细胞组基本未见荧光,用药组可见荧光,低浓度以绿色荧光为主,高浓度以红色荧光为主。RT—PCR检测结果显示Survivin基因的表达强度随着药物浓度的增加逐渐变弱。结论:维生素K3可协同As2O3诱导前列腺癌细胞株PC-3凋亡,故可降低As2O3了的使用剂量,从而减少其副作用,为As2O3治疗前列腺癌临床广泛应用奠定了基础。
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