多频谱免疫组化检测PD-1、PD-L1、CEACAM-1和TIM-3在下咽癌中表达及临床意义

来源 :川北医学院 | 被引量 : 1次 | 上传用户:m237912904
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目的:探索程序性死亡受体1(programmed death 1,PD-1)、其主要配体程序性死亡配体1(programmed death ligand-1,PD-L1)、癌胚抗原相关粘附分子1(carcinoembryonic antigen-related cell adhesion molecule 1,CEACAM-1)以及T细胞免疫球蛋白黏蛋白3(T cells immunoglobulindomain and mucin domain protein-3,TIM-3)在晚期下咽癌患者中的表达以及与临床意义,分析其与病理、肿瘤微环境中的免疫细胞之间的相互关系,为PD-1、PD-L1、CEACAM-1以及TIM-3相应抑制剂在晚期下咽患者中的应用提供依据。方法:收集2011/3至2014/11在解放军总医院经手术切除、未经放化疗处理的39例下咽癌患者的相关资料(年龄、性别、手术相关资料、病理分型、临床分期以及随访情况等)和石蜡标本,制备石蜡切片。应用免疫组化染色判断PD-1、PD-L1、CEACAM-1以及TIM-3在下咽癌石蜡切片上是否表达以及肿瘤微环境中CD4+T、CD8+T、调节性T细胞(Regulatory cells,Tregs)、以及巨噬细胞的表达情况。对免疫组化染色阳性的标记进行多频谱的免疫组化染色,使用PerkinElmer vectra全自动智能切片分析系统进行定性、定量的统计。结果:在晚期下咽癌中,CD4、CD8以及PD-L1的阳性表达率与患者的病理分型有关,肿瘤微环境中的CD4阳性率随着分化程度的降低逐渐增高(p=0.01<0.05),肿瘤间质免疫细胞上以及整个微环境中CD8在中分化组中表达率最低,高分化组居中,低分化组中最高(p=0.04<0.05,p=0.03<0.05)。肿瘤微环境中PD-L1的表达与患者的病理分型有关(p=0.01<0.05),中分化组中PD-L1的表达量最低,高分化居中,低分化最高。CEACAM-1、TIM-3与患者的临床分期相关,在IVA期患者中的阳性率高于IIII期(p=0.02<0.05,p=0.03<0.05)。PD-1、PD-L1、Foxp3、CEACAM-1、TIM-3阳性率与患者的术后生存时间有关,PD-1、PD-L1、Foxp3以及CEACAM-1阳性表达率高的组患者术后生存时间长(p=0.03<0.05,p=0.02<0.05,p=0.04<0.05,p=0.03<0.05),TIM-3的阳性表达率高组患者术后生存时间短(p=0.048<0.05)。在相关性上,癌旁间质中免疫细胞上PD-1、PD-L1的表达量呈正相关,spearman检查结果:r=0.443,p=0.005<0.05。在肿瘤微环境中PD-1、PD-L1与CD8的表达呈正相关,spearman检查结果分别:r=0.686,p<0.0001;r=0.575,p=0.0001。癌旁间质中免疫细胞上PD-1、PD-L1与Foxp3的表达呈正相关,spearman检查结果:r=0.617,p<0.0001;r=0.667,p<0.0001。在肿瘤微环境中,PD-L1与CD4、CD68表达呈正相关,spearman检查结果:r=0.533,p=0.0005;r=0.533,p=0.0005。结论:PD-1、PD-L1、CEACAM-1以及TIM-3在晚期下咽鳞癌中表达。其中,PD-L1阳性率的高低与下咽鳞癌患者肿瘤细胞核的分化程度存在联系;CEACAM-1、TIM-3的表达影响患者的临床分期;PD-1、PD-L1、Foxp3、CEACAM-1、TIM-3阳性率的高低对患者术后生存时间有影响,其中PD-1、PD-L1、Foxp3、CEACAM-1的阳性率高者术后生存时间较长,而TIM-3阳性高者术后生存时间较短。癌旁间质中免疫细胞上PD-1、PD-L1的表达,在肿瘤微环境中PD-1、PD-L1与CD8的表达,癌旁间质中免疫细胞上PD-1、PD-L1与Foxp3的表达,以及PD-L1与肿瘤微环境中的CD4、CD68表达均呈正相关关系。
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