热休克蛋白gp96-肽复合物的提取及纯化 热休克蛋白gp96-肽复合物诱导肿瘤免疫的实验研究

来源 :南通医学院 南通大学医学院 南通大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:Miss_Han
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目的 建立H22肝癌细胞中提取纯化热休克蛋白gp96-肽复合物的方法.方法 1.制备H22肝癌细胞蛋白:H22肝癌细胞裂解、离心、过滤及透析后获得.2.gp96-肽复合物的纯化:上述可溶性H22肝癌细胞蛋白经分级硫酸铵盐析后,依次用ConA-Sepharose亲和层析、DEAE-Sephacel离子交换层析分离纯化.3.gp96-肽复合物的定性及定量分析:所得蛋白经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳和Western Blot进行蛋白分子量及性质鉴定,Lowry法测定其浓度.结果 此分离、纯化得到的蛋白经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳、银染鉴定为单一带,分子量为96KD;Western Blot结果证实为HSPgP96.每20ml H22细胞压积最终获得1mg的gp96-肽复合物.结论 使用本分离纯化方法可获得高纯度gp96-肽复合物.
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