目前,化疗在肿瘤治疗中有着重要的地位,而且随着化疗药物的应用,肿瘤对其耐药性日益增加。肿瘤细胞多药耐药性(Multidrugresistance, MDR)的产生是阻碍肿瘤化疗成功的主要因素之一。因此,肿瘤 MDR 问题的解决将为肿瘤的治疗开拓广阔的前景。蛋白质组学作为后基因组学时代研究的一个重要内容,已广泛深入到生命科学和医药学的各个领域,其理论和技术的发展完善为肿瘤多药耐药研究带来了新的思维方式和研究领域,它可以从组织或细胞蛋白质整体水平这一全新角度来研究肿瘤多药耐药机制。1975 年由 O’Farrell 建立的二维电泳技术凭借其出色的分辨能力,迄今为止仍然是蛋白质组研究中的核心技术。但因其步骤十分繁琐,影响因素多,故重复性差。固相 pH梯度(immobilized pH gradient,IPG)技术的出现,克服了载体两性电解质形成的 pH 梯度在等电聚焦过程中易漂移的缺点,使二维电泳技术的重复性和分辨率得到了极大的提高。本实验运用固相 pH 梯度双向电泳技术展示并比较胃癌细胞 SGC7901 和阿霉素诱导的耐药细胞SGC7901/ADR 表达的蛋白质,展示两者差异以发现新的与胃癌多药耐药相关的蛋白质分子,为进一步研究胃癌多药耐药机制奠定基础。 方法:采用化学裂解方法提取胃癌细胞 SGC7901 和阿霉素诱导的耐药细胞 SGC7901/ADR 总蛋白质,Bradford 法测定蛋白质浓度,固相pH 梯度双向凝胶电泳分离胃癌细胞及其耐药细胞的总蛋白质,凝胶经银染显色后,ImagingMaster 2D Melanie 5.0 图像分析软件进行比较分析,识别差异表达的蛋白质。