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背景:慢性传输型便秘（slow transit constipation,STC）是临床常见的消化性疾病,也属于功能性便秘中的常见类型。研究表明,在肠脑轴理论基础上,PI3K/AKT/mTOR信号通路调控STC的结肠及脑组织细胞自噬过程是STC发生发展的关键机制及治疗的重要靶点,中医药在治疗STC过程中可以发挥重要作用,本次实验研究进一步明确加味通便汤治疗STC的临床疗效,同时探索其作用机制。目的:从PI3K/AKT/mTOR自噬通路角度出发,探索加味通便汤对STC的临床疗效评价及其作用具体机理,以此更好地深入理解肠脑同治、上下同治理论从而发挥中医药的独特优势。方法:1.临床试验将68名STC患者随机分为莫沙必利组34名,加味通便汤组34名。通过运用主要疗效指标（痊愈率、愈显率、总有效率）、次要疗效指标（STC及相关症状评分量表）、实验室观察指标（结肠传输指数及脑肠肽含量水平）,明确加味通便汤干预4w后对STC患者临床疗效的评价。统计分析临床总有效率、PAC-SYM量表评分、ZUNG氏焦虑及抑郁量表评分、生活质量量表（PAC-QOL）评分、匹兹堡睡眠质量量表（PSQI）评分、结肠传输功能指数,利用ELISA检测脑肠肽5-HT、SP、NPY、CGRP的表达情况。2.动物实验2.1选取健康雄性SD大鼠共70只,STC大鼠模型复制成功后,按照随机数字表法分为空白对照组、自然恢复组、莫沙必利组、盐酸氟西汀组、加味通便汤高、中、低剂量组各10只。药物干预4w后,观察大鼠的一般情况,测定大鼠的体质量、饮食量及饮水量,测定大鼠24h粪便总数及含水量、大鼠肠道碳末推进率及结肠粪便留存总数、大鼠结肠肌电活动、评价大鼠抑郁样行为学,包括进行大鼠旷场实验、糖水偏好指数及悬尾不动实验,HE染色大鼠结肠及脑组织、透射电镜观察结肠及脑组织的亚细胞结构、ELISA测定大鼠血清、结肠及脑组织中脑肠肽5-HT、SP、NPY、CGRP的表达情况、Western Blot检测大鼠结肠及脑组织PI3K/AKT/mTOR信号通路蛋白水平变化情况。2.2选取健康雄性SD大鼠共60只,STC大鼠模型复制成功后,按照随机数字表法分为空白组、模型组、莫沙必利组、盐酸氟西汀组、加味通便汤高剂量组、信号通路抑制剂组各10只。药物干预4w后,运用HE染色大鼠结肠及脑组织,透射电镜观察结肠及脑组织的亚细胞结构,Western Blot检测大鼠结肠及脑组织PI3K/AKT/mTOR信号通路、自噬相关蛋白的表达,q-PCR检测大鼠结肠及脑组织PI3K/AKT/mTOR通路、自噬相关基因的mRNA表达情况。结果:1.临床试验与莫沙必利组相比,加味通便汤组的痊愈率（P＜0.05）、愈显率（P＜0.01）、总有效率均升高（P＜0.05）,PAC-SYM总积分显著降低（P＜0.01）,PAC-SYM单项积分降低有显著意义（P＜0.01）,SAS、SDS评分显著降低（P＜0.01）,PAC-QOL、PSQI评分显著降低（P＜0.01）,48h后结肠传输指数明显提高（P＜0.01）,5-HT、SP含量明显上升（P＜0.01）,NPY、CGRP 含量明显下降（P＜0.01）。2.动物实验2.1（1）观察大鼠的一般情况、测定大鼠的体质量、饮食量及饮水量:与空白对照组相比,自然恢复组一般情况较差,体质量、饮食量及饮水量明显下降（P＜0.01）;与自然恢复组相比,莫沙必利组及盐酸氟西汀组大鼠体质量、饮食及饮水量增长缓慢（P＜0.05）,加味通便汤组大鼠体质量、饮食及饮水变化呈现明显递增趋势（P＜0.01）,且呈现剂量依赖性（P＜0.01）。（2）测定大鼠24h粪便总数及含水量、大鼠肠道碳末推进率及结肠粪便留存总数、大鼠结肠肌电活动:与空白对照组相比,自然恢复组大鼠24h粪便总数及含水量明显下降,大鼠肠道碳末推进率明显下降,结肠粪便留存总数明显增多,结肠慢波收缩频率减小,振幅增大,频率及振幅变异系数均增大;与自然恢复组相比,盐酸氟西汀组大鼠的24h粪便总数及含水量、大鼠肠道碳末推进率及结肠粪便留存总数、大鼠结肠肌电活动均未见明显变化,莫沙必利组、加味通便汤组可以明显增加大鼠24h粪便总数,提高粪便含水量,提升小肠碳末推进率,降低结肠粪便留存总数,改变结肠肌电活动促进结肠蠕动。（3）评价大鼠抑郁样行为学,包括测定大鼠旷场、糖水偏好指数及悬尾不动实验:与空白对照组相比,自然恢复组大鼠中央区域停留时间缩短,总行程距离减少,穿越网格次数减少,糖水偏好指数下降,悬尾不动时间增加;与自然恢复组相比,莫沙必利组大鼠的抑郁样行为未见明显变化,盐酸氟西汀、加味通便汤组大鼠中央区域停留时间明显延长,总行程距离及穿越网格次数明显增加,糖水偏好指数升高,悬尾不动时间明显下降。（4）HE染色大鼠结肠及脑组织、透射电镜观察结肠及脑组织的亚细胞结构、ELISA测定大鼠血清、结肠及脑组织中的脑肠肽5-HT、SP、NPY、CGRP的表达情况、Western Blot检测大鼠结肠及脑组织的PI3K/AKT/mTOR信号通路蛋白水平变化情况:与空白对照组相比,自然恢复组大鼠的结肠及脑组织HE染色出现明显的病理损伤,自噬体增多,血清及结肠组织中的脑肠肽5-HT、SP含量明显下降,NPY、CGRP含量明显上升,脑组织中的脑肠肽5-HT、NPY含量明显下降,SP、CGRP含量明显上升,PI3K、AKT、mTOR磷酸化的表达水平明显下降;与自然恢复组相比,HE染色观察莫沙必利组大鼠结肠组织病理损伤减轻,盐酸氟西汀组大鼠脑组织病理损伤减轻,但是两者的自噬体未见明显变化,ELISA测定莫沙必利组大鼠血清及结肠组中的5-HT、SP含量增加,NPY、CGRP含量减少,在脑组织中的5-HT、SP及NPY、CGRP含量未见明显变化,ELISA测定盐酸氟西汀组大鼠脑组织中5-HT、NPY含量增加,SP、CGRP含量减少,血清中脑肠肽5-HT、SP含量增加,NPY、CGRP含量减少,结肠组织中脑肠肽含量未见明显变化,Western Blot检测莫沙必利组及盐酸氟西汀大鼠结肠及脑组织的PI3K/AKT/mTOR信号通路蛋白表达未见明显变化;加味通便汤组能明显修复结肠及脑组织的病理损伤,明显减少自噬体的数量,调控结肠及脑组织中脑肠肽5-HT、SP、NPY、CGRP含量变化,脑组织、结肠组织中的PI3K、AKT、mTOR磷酸化的表达水平明显升高。2.2与空白组相比,模型组大鼠结肠及脑组织HE染色出现病理损伤,透射电镜观察结肠及脑组织出现自噬体增多,Western Blot、q-PCR检测结肠及脑组织中PI3K/AKT/mTOR信号通路表达下降,自噬相关分子LC3、Beclin1表达上升,p62表达下降;与模型组相比,莫沙必利组、盐酸氟西汀组及信号通路抑制剂组未见明显变化,加味通便汤组能明显修复大鼠结肠及脑组织的病理损伤,明显减少自噬体的产生,PI3K/AKT/mTOR信号通路表达明显上调,自噬相关分子LC3、Beclin1表达明显下调,p62表达明显上调。结论:1.STC能诱导抑郁的形成,STC存在肠脑同步损伤的病理,加味通便汤能够发挥同步的肠脑的保护作用,同时改善STC的肠道及抑郁症状,然而莫沙必利及盐酸氟西汀只有单靶点的改善作用。2.在肠脑轴的理论基础下,加味通便汤能够对PI3K/AKT/mTOR信号通路产生激活作用,抑制结肠及脑组织细胞自噬水平,调控脑肠肽表达变化,增强肠道传输功能及抗抑郁作用。