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第一部分新型阿霉素前体药PDOX对胃癌模型的疗效研究背景与目的：胃癌死亡率在发展中国家位列第二,临床上常用治疗方法包括手术治疗、放疗、化疗及生物治疗等。化疗为进展期胃癌综合治疗的重要方式之一,如蒽环类药物多柔比星(Doxorubicin, DOX),因其临床有效且伴有显著心脏毒性而成为一把双刃剑。基于DOX这一特点,我们设计出一种阿霉素前体药,新型阿霉素(Ac-Phe-Lys-PABC-DOX, PDOX)。本研究结合我国胃癌治疗实际,评估DOX与PDOX对荷瘤鼠皮下瘤模型(subcutaneous model, SC)和荷瘤鼠人胃癌原位移植瘤模型(surgical orthotopic implantation model, SOI)的疗效和毒副作用,在充分研究进展期胃癌关键分子生物学行为的基础上,探讨PDOX由基础实验研究向临床研究转化的可行性,为发展PDOX分子靶向治疗前景奠定基础。材料与方法：建立BGC-823荷瘤鼠人胃癌皮下瘤模型和MGC-803荷瘤鼠人胃癌原位移植瘤模型。SOI模型中将动物随机分为5组,分别为Control组(Control,n=12,生理盐水10mL/kg),DOX组(n=6,4.0mg/kg),PDOX低剂量组(PDOX-L, n=6,21.6mg/kg),PDOX中剂量组(PDOX-M, n=6,28.8mg/kg),PDOX高剂量组(PDOX-H, n=6,36.0mg/kg),分别于接种后第10、13、17天按体重于尾静脉注射给药,实验终点即第21天,予以安乐死,评估荷瘤鼠整体状态。SC模型中将动物随机分为3组,分别为Control组(n=11,生理盐水10mL/kg)、DOX组(n=12,4.0mg/kg)和PDOX组(n=12,28.8mg/kg)接种后第10、17、24天按体重于腹腔注射给药,每周进行两次详细全面记录。末次给药后一周即第31天终止实验,眼球采血行血常规、生化检查；解剖实验动物,详细记录胃部肿瘤及腹腔播散情况,对肿瘤进行称重,计算抑瘤率；取相关组织进行组织病理学检查。结果：与Control相比,SC和SOI模型中,PDOX组和DOX组均可显著抑制肿瘤生长(P<0.05)。在SC模型血常规指标中,DOX组未到实验终点即有半数动物死亡,数据出现偏倚,因此无法表现出真实的实验结果,未纳入血液学结果分析。PDOX组血小板计数(PLT)显著高于Control组(P<0.05),淋巴细胞比例显著低于Control组(P<0.05)；而红细胞计数和血红蛋白在三组间差异无统计学意义(P>0.05)。在心功能指标中,PDOX组CK-MB水平高于Control组(P<0.01)。CK、LDH、肝功能及肾功能指标三组间均无统计学意义(P>0.05)。HE染色结果显示,PDOX组和DOX组腹壁转移显著低于Control组；PDOX组淋巴管癌栓发生率显著低于Control组和DOX组(P<0.05)。结论：PDOX对两种胃癌模型的整体疗效与DOX相当,但其可维持动物整体状态,缩小肿瘤体积,减轻肿瘤负荷,显著降低毒副作用,为PDOX由临床前研究转向临床研究提供有力依据。第二部分新型阿霉素前体药PDOX的药物分子机制研究背景与目的：胃癌是消化系统最常见的恶性肿瘤之一。传统化疗药物常缺乏靶向性,伴随严重毒副作用而使临床应用局限性。近年来以DOX为基础开发的分子靶向治疗药物日益增多,本课题组结合临床实际开发的新型阿霉素前体药PDOX对多种类型恶性肿瘤疗效显著,毒性降低,然而PDOX分的子机制仍未明确。本研究旨在通过对胃癌原位种植模型的治疗作用,探讨PDOX潜在的药物分子机制,为进一步深入发展PDOX成为分子靶向治疗新策略奠定基础。材料与方法：MGC-803人胃低分化腺癌细胞系建立胃癌原位种植模型,将动物随机分为3组,分别为Control组(n=11,生理盐水10mL/kg)、DOX组(n=12,4.0mg/kg)和PDOX组(n=12,28.8mg/kg)。接种后第10、17、24天按体重于腹腔注射给药,每周进行两次详细全面记录。末次给药后一周即第31天终止实验,于实验终点即D31安乐死动物,取荷瘤鼠肿瘤组织行免疫组织化学分析,行肿瘤增殖、凋亡、血管、淋巴管生成指标细胞阳性率定量分析,以及细胞凋亡及细胞周期蛋白半定量分析。结果：免疫组化结果显示PDOX组Ki-67水平显著低于DOX与Control组,三组间两两比较均有统计学意义(P<0.01)；Western blotting结果显示PDOX组P53, P21, Aparf-1, pro-和cleaved-caspase3表达显著高于对照组和DOX组,同时PDOX可通过上调Cdc25,Cyclin D,CDK4等细胞周期调节蛋白,降低Ki-67细胞阳性率,提高Tunel细胞阳性率,从而抑制肿瘤细胞增殖,促进细胞凋亡,提高抗肿瘤效应。结论：PDOX通过上调P53/P21表达,通过P53介导线粒体凋亡通路和P53依赖性细胞周期阻滞于G1/S期。