阿霉素（Doxorubicin,DOX）又称多柔比星,是临床广泛使用的一种蒽环类抗肿瘤抗生素,主要用于乳腺癌、肝癌、淋巴瘤等恶性肿瘤的治疗,但化疗过程中产生的心脏毒性以及多药耐药限制了其临床应用。黄芪注射液是我国较早开发的中药注射液品种之一,具有益气养元,扶正祛邪,养心通脉,健脾利湿的功效,临床常与阿霉素联用治疗乳腺癌、胃癌、肺癌等以提高疗效,同时可拮抗DOX引起的心脏毒性、骨髓间干细胞凋亡以及胃肠道反应。然而,黄芪注射液化学成分复杂,联用时对阿霉素体内代谢过程的影响尚不明确。CYP450酶参与约90%药物的代谢,其活性的改变是影响药物代谢的关键机制。为此,本论文首先采用超高效液相色谱串联质谱（ultra-performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry,UPLC-MS/MS）技术研究了黄芪注射液与阿霉素联用对阿霉素药代动力学的影响;进一步建立Cocktail探针药物法,结合大鼠肝微粒体外孵育实验,研究了黄芪注射液对肝脏CYP450酶代谢活性的影响,为临床用药提供参考。主要研究内容如下:1.大鼠血浆中阿霉素UPLC-MS/MS测定方法的建立与验证首先建立了大鼠血浆样品中DOX测定的UPLC-MS/MS方法,并进行了方法学考察。结果表明,所建立的UPLC-MS/MS分析方法专属性良好,线性范围与定量下限、准确度、精密度、提取回收率及基质效应、稳定性、稀释倍数均符合生物样品测定要求,可用于大鼠血浆中DOX药物浓度的测定。2.黄芪注射液对阿霉素药代动力学的影响采用UPLC-MS/MS技术分别测定DOX单用及联用黄芪注射液后不同时间点大鼠血浆中的药物浓度,计算相关PK参数,分析联用组与单用组阿霉素药代动力学参数的差异,探索黄芪黄芪注射液对DOX药代动力学特性的影响。结果表明:与单用组相比,联用组DOX血药浓度升高,下降趋势较单用组缓慢。将两组血药浓度选择二室模型进行拟合,得到药代动力学参数,联用组与单用组相比,最大血药浓度（Cmax）、分布半衰期（t1/2α）、药时曲线的曲线下（AUC0-t/AUC 0-∞）、中央室向外周室转运一级常数（k12）均显著提高,表观分布容积（Vd）、清除率（CL）、中央室消除一级速度常数（k10）均显著降低,表明黄芪注射液与阿霉素联用时能引起阿霉素药代动力学的改变。3.肝脏CYP450酶活性测定方法的建立分别选择非那西丁、安非他酮、甲苯磺丁脲、硝苯地平、美托洛尔、氯唑沙宗作为CYP1A2、CYP2B6、CYP2C9、CYP2D1、CYP2E1的探针底物,根据底物最大吸收波长及极性特点研究建立了在大鼠肝微粒体体外孵育系统中同时测定CYP2D1、CYP2E1特异性探针底物及同时测定CYP1A2、CYP2B6、CYP2C9、CYP3A4特异性探针底物的HPLC方法,并进行了方法学验证。结果显示:2种HPLC分析方法的专属性、线性范围与定量下限、准确度、精密度、提取回收率、稳定性均符合生物样品测定需求,可用于孵育体系中探针含量的测定。同时,本论文还对于体外实验的孵育条件进行了优化,使体系蛋白浓度和孵育时间与探针底物的代谢呈线性关系,进一步保证了药物代谢酶活性测定的准确性。4.黄芪注射液对肝脏CYP450酶活性的影响“Cocktail”探针药物法结合肝微粒体体外孵育实验的结果表明,联用组与单用组相比,CYP2D1酶活性升高;CYP1A2、CYP2C9、CYP2E1、CYP3A4酶活性降低;CYP2B6酶活性无明显变化。即黄芪注射液能显著抑制CYP1A2、CYP2C9、CYP2E1、CYP3A4酶活性,增强CYP2D1酶活性,黄芪注射液影响阿霉素药代动力学的潜在机制可能与其能够抑制肝脏CYP450酶活性有关。提示黄芪注射液和阿霉素联用后可能会产生相互作用,这在两药的临床应用中应值得关注。综上,本论文通过UPLC-MS/MS技术与肝微粒体外孵育实验,探讨了黄芪注射液对阿霉素药代动力学及肝脏CYP450酶活性的影响,初步阐释了两药联用可能存在的相互作用及潜在机制,为临床合理用药提供了指导。