MMP-3在DDH髋臼软骨中表达与病理改变相关性研究

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目的:测定发育性髋关节脱位(developmental dislocation of the hip,DDH)髋臼软骨组织中基质金属蛋白酶-3(matrix metalloproteinase-3,MMP-3)的表达和观察DDH髋臼软骨的形态学改变,探讨DDH髋臼软骨细胞中MMP-3的表达与髋臼软骨发育不良及退变关系。方法:标本来自遵义医学院附属医院和贵阳市儿童医院2007年1月~2008年6月手术治疗的DDH 30例,标本取于髋臼外1/3表面凸起不平处修整的髋臼软骨。分组:T(DDH组)髋臼软骨标本30例,根据年龄分为T1组(2~5岁)13例,T2组(5~14岁)17例;C组(对照组)髋臼软骨标本15例(取自本校解剖教研室小儿尸体)。所有标本进行以下研究:(1)大体观察;(2)组织学观察,将标本利用福尔马林溶液固定24小时,梯度脱水、透明、浸蜡、石蜡包埋、切片、HE染色,显微镜下观察组织学形态的改变;(3)测定髋臼软骨组织中MMP-3的表达,标本切片前操作同HE染色,采用免疫组化DAB显色技术染色及SPSS13.0统计学软件进行统计分析。结果:(1)大体观察:C组(对照组)软骨表面表面光滑;T2组(实验2组)软骨形态学改变明显,肉眼可见软骨表面的透明度和弹性明显降低,表面粗糙,髋臼外1/3部分凹凸不平,T1组(实验1组)的改变不如T2组(实验2组)明显。(2)HE染色光镜下组织形态学观察:C组(对照组)见以软骨基质为主,染色均匀,软骨细胞排列均匀,由表及里逐渐减少,呈陷窝状并均匀地散落于基质中,表层细胞核呈圆形,平行排列,深层呈梭形,柱状排列。T1组(实验1组)软骨基质染色不均匀,嗜染程度稍下降,软骨细胞排列不均匀;T2组(实验2组)见软骨基质染色不均匀,嗜染度下降,软骨基质间出现裂隙,可见纤维化,纤维束与关节面呈纵向交错排列,软骨细胞排列不均匀,可见成簇的细胞堆积,部分软骨细胞数量明显减少,并出现细胞核固缩现象,细胞周围陷窝增大,呈圆形,部分陷窝减小或消失。(3)免疫组化染色观察,MMP-3阳性呈鲜明棕黄色染色颗粒,主要在细胞浆中表达。T组(实验组)髋臼软骨的MMP-3阳性17例,阳性率56.67%,C组(对照组)髋臼软骨的MMP-3阳性1例,阳性率6.67%,T组阳性率高于C组。用SPSS13.0统计学软件进行X2检验,P<0.05,具有统计学意义。T1组(实验1组)弱阳性2例,阳性3例,强阳性0例,阳性率16.67%;T2组(实验2组)弱阳性5例,阳性6例,强阳性1例,阳性率40%,T2组阳性率高于T1组,经SPSS13.0统计学软件进行相关检验,P<0.05,有统计学意义,MMP-3表达的强弱与年龄大小呈正相关。结论:1.实验组(T组)髋臼软骨组织中MMP-3阳性率(56.67%)高于对照组(6.67%),有统计学意义;2.T2组(实验2组)髋臼软骨组织中MMP-3阳性率(40%)高于T1组(实验1组)(16.67%),MMP-3表达强弱与年龄呈正相关,随年龄增大表达增强;3、DDH组(T组)髋臼软骨组织形态学观察有软骨细胞发育不良和严重的退变现象,并且与MMP-3的阳性表达程度相关联,表明MMP-3与DDH患儿髋臼软骨发育不良及退变有密切关系,在DDH的病理发展过程中可能起重要作用。
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