近年来,食品安全问题（农兽药残留、违禁物的添加和致病微生物等）引起了全球关注,与之相关的食品安全检测方法也受到了广泛的重视。免疫层析法与常见的一些检测方法（传统培养法、分子生物学方法和仪器分析方法等）相比,具有简便、灵敏、快速和成本低等优点。免疫层析法基于抗原与抗体的特异性结合原理,其定性或半定量分析的结果一般通过裸眼观察即可得到,定量分析结果则需借助试纸条信号读取仪。为了扩大其应用范围,多种纳米标记物被应用于免疫层析方法,取得了较多的研究成果。本文第二章选用胶体金为标记物,采用竞争抑制模式,建立了定性和定量检测氟苯尼考的免疫层析方法,比较了不同的样本前处理方式对实验结果的影响。定性分析的结果是通过裸眼观测检测线和质控线是否显色来进行判定,定量分析可借助试纸条信号读取仪建立标准曲线来实现。为了得到更好的实验结果,本研究对胶体金标记抗体时溶液pH值和抗体浓度、结合垫上金标抗体喷量、检测线上全抗原浓度以及检测时间等参数进行了优化。结果表明:本方法用于检测鸡肉中的氟苯尼考,定性分析的检测限为25 ng/mL;定量分析的线性范围为0.125².50 ng/m L,检测限为0.115 ng/m L;检测时间为15 min;鸡肉样本采用水煮法的前处理方式时所得的提取液无需稀释即可用于后续分析,具有快速简便等优点,非常适用于样本的现场检测。本文第三章选用Pd–Pt纳米粒子（Nanoparticles,NPs）为标记物,采用双抗夹心模式,建立了一种定性和定量检测大肠杆菌O157:H7的免疫层析方法。利用Pd–Pt NPs良好的类过氧化物酶的催化活性,以3,3′,5,5′-四甲基联苯胺为显色底物来对试纸条的信号进行放大,从而提高检测的灵敏度。定性分析可以直接通过观测检测线和质控线是否显色来判定,定量分析的结果则可根据相应的标准校正曲线计算得出。本研究对Pd–Pt NPs标记抗体时溶液pH值、抗体浓度、Pd–Pt NPs浓度、用于单个免疫层析试纸条的Pd–Pt NPs标记抗体后的复合物用量以及检测时间等重要实验参数进行了优化。结果表明:本方法用于检测牛奶中大肠杆菌O157:H7,定性分析的灵敏度为1.0×10³ cfu·mL^-1;定量分析的线性范围为1.0×10³¹.0×10⁶ cfu·mL^-1,灵敏度为9.0×10² cfu·mL^-1。本方法与传统的胶体金试纸条相比,灵敏度提高了111倍。基于Pd–Pt纳米酶的免疫层析法对于检测食品基质中的食源性致病菌有较大的应用前景。