论文部分内容阅读
三聚氰胺原是常用的化工原料,因其含氮量较高(66%),价格低廉,而被一些不法企业用作奶粉添加剂,以此造成奶粉中蛋白质含量高的假象。三聚氰胺在人体内水解成三聚氰酸,二者依靠氢键作用形成不溶于水的三聚氰胺氰尿酸盐,造成输尿管的阻塞,导致肾脏衰竭,甚至诱发膀胱癌。因此,为了确保食品安全,保证人们的健康,研究建立快速、高效、高灵敏度的检测奶粉中三聚氰胺含量的方法,具有十分重要的实际意义和应用价值。目前用于检测三聚氰胺的方法有气相色谱-质谱法(GC-MS)、高效液相色谱法(HPLC)。GC法需要衍生化,过程比较繁琐。HPLC法灵敏度高、抗干扰能力强,但样品前处理步骤复杂且涉及大量有机溶剂。毛细管电泳(CE)由于具备分析速度快、分辨率高、样品消耗量少等优点,而被广泛用于化工、环境、医药、生命科学等领域。本论文采用聚多巴胺(PDA)辅助水解聚(2-甲基-2-噁唑啉)(即聚(2-甲基-2-嗯唑啉-乙烯亚胺),PMOXA-EI)一步法共沉积涂层毛细管,结合紫外检测器,定量分析检测奶粉中的三聚氰胺。本文主要包括以下几个方面的工作：首先考察了制备涂层毛细管所用多巴胺(DA)和PMOXA-EI的浓度、PMOXA的分子量和水解度对分离四种碱性混合蛋白(细胞色素c、溶菌酶、核糖核酸酶A和α-胰凝乳蛋白酶原A)的影响。当DA浓度为6 mg/mL, PMOXA-EI的浓度为10 mg/mL时,PDA/PMOXA-EI涂层毛细管可实现对四种蛋白的基线分离；当PMOXA分子量为1 kDa,水解度为0.4时,其与DA共混涂层毛细管分离蛋白的效果最好。在一次涂层(PDA/PMOXA1k-EI0.4)的基础上,我们制备了二次涂层(PDA/PMOXA1k-EI0.4+PMOXA1k-EI0.4),二次涂层毛细管相比于一次涂层毛细管,蛋白质分离效率更高。将PDA/PMOXA1k-EIo.4+PMOXA1k-EI0.4涂层毛细管用于检测奶粉中的三聚氰胺,奶粉中可以检测到三聚氰胺的最低量为4 mg/kg,三聚氰胺日内和日间的加标回收率分别为92.13%-102.47%和92.22%-100.30%,相对标准偏差分别为2.07%-4.98%和2.43%-3.77%。PDA/PMOXA1k-EI0.4+PMOXA1k-EI0.4涂层毛细管在连续使用45天后,仍能用于奶粉中三聚氰胺的检测,测得三聚氰胺的回收率为91.85%-106.14%。同时将本文所用CE法同国标GB/T 22388-2008中的HPLC法进行了比较,HPLC法测定三聚氰胺的回收率为93.36%-100.13%,这与我们提出的CE法的回收率(92.13%-102.47%)几乎一致,表明我们提出的样品前处理非常简单的CE法可以作为分析检测被污染奶粉中三聚氰胺含量的替代方法。