目的:研究ACE2基因转染SD大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞后抑制大鼠平滑肌细胞AT1受体表达方法:1.取SD大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞(VSMC)用组织块培养法培养平滑肌细胞。2.扩增本研究系列已经构建好含有ACE2基因的质粒pc-DNA 3.1–hygro (+)-mACE2的大肠杆菌,并大量抽提质粒DNA。3.用脂质体法将含有ACE2基因的质粒pc-DNA 3.1–hygro (+)-mACE2转染SD大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞(VSMC)。4.随机分为正常细胞组、空载体组、ACE2组、AngⅡ组、厄贝沙坦组、ACE2 +AngⅡ组、厄贝沙坦+ACE2组、厄贝沙坦+ACE2+ AngⅡ组,采用RT-PCR及Western-Blot技术分别检测AT1受体mRNA和蛋白的表达。以研究ACE2对AngⅡ诱导的的大鼠平滑肌细胞AT1受体表达的关系,初步探讨ACE2-Ang(1-7)- Mas轴和ACE- AngⅡ-AT1轴之间的相互调节作用机制。结果:1.ACE2转染大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞呈时间依赖性及浓度依赖性抑制AT1受体mRNA的表达。2. AngⅡ干预大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞呈时间依赖性及浓度依赖性诱导平滑肌细胞AT1受体mRNA的表达。3. ACE2过表达能抑制AngⅡ诱导的大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞AT1受体mRNA的表达。4.厄贝沙坦干预大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞呈时间依赖性抑制及浓度依赖性抑制大鼠胸主动脉平滑肌细胞AT1受体mRNA的表达。5.ACE2与厄贝沙坦干预平滑肌细胞后对抑制AT1受体mRNA的表达有协同作用。6.蛋白免疫印迹法(Western-Blot)证实AngⅡ诱导大鼠胸主动脉平滑肌细胞后AT1受体蛋白的表达明显增加,与空白对照组相比P<0.05。厄贝沙坦抑制大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞AT1受体蛋白的表达,较空白对照组明显减少, P<0.05。ACE2转染大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞后AT1受体蛋白的表达明显减少,与空白对照组对比P<0.05。ACE2抑制AngⅡ诱导的大鼠胸主动脉平滑肌细胞AT1受体蛋白的表达,与AngⅡ组比较明显减少,P<0.05。结论:ACE2基因转染大鼠胸主动脉平滑肌细胞具有下调AT1受体mrNA和蛋白表达作用。ACE2过表达能抑制AngII诱导的大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞AT1受体mRNA和蛋白的表达。ACE2对AT1受体的抑制作用不是通过直接的与AT1受体制mRNA和蛋白的表达有协同作用。ACE2对AT1受体的抑制作用不是通过直接的与AT1受体结合,而是可能通过对AngII的分解作用实现的。