STRIPAK复合物的生物化学与初步晶体学研究

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STRIPAK(Striatin-interacting phosphatase and kinase)复合物是新近鉴定出的超大分子复合物。该复合物在进化上十分保守,普遍存在于真菌直至高等哺乳动物中。哺乳动物的STRIPAK复合物在个体发育、免疫反应以及癌症发生等多个生理病理过程中发挥重要调控作用。在该复合物中,Striatin(STRN)家族蛋白作为分子桥梁通过多种支架蛋白招募PP2A磷酸酶和GCK激酶。这些支架蛋白主要包括SIKE1及其同源蛋白FGFR1OP2、SLMAP及其同源蛋白TRAF3IP3、CTTNBP2及其同源蛋白CTTNBP2NL、CCM3以及MOB4等。然而,其中大多数组分之间的相互作用关系以及调控机制仍不清楚。本文对STRIPAK复合物中的关键组分STRN3、SIKE1/FGFR1OP2以及SLMAP进行了相互作用分析,并对部分组分进行了初步晶体学研究。我们对STRN3、SIKE1以及SLMAP的多个片段进行了表达与纯化。体外相互作用分析发现SIKE1/FGFR1OP2通过不同区域分别与STRN3以及SLMAP直接相互作用。SIKE1通过其coiled coil1结构域识别SLMAP的coiled coil1结构域,而其coiled coil2结构域识别STRN3中间区域的氨基酸166-190片段。在此基础上,我们对SIKE1/FGFR1OP2的coiled coil1和2结构域进行了表达、纯化与结晶,并取得了初步进展。对于FGFR1OP2的coiled coil1结构域,目前已获得一套分辨率为3.5(A)的X射线衍射数据。后续工作将解析这些STRIPAK关键组分及其复合物的三维结构,为进一步深入研究STRIPAK的装配、功能及其机制提供生化与结构基础。
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